急性創(chuàng)傷性凝血病大鼠模型的建立.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:
  在世界范圍內(nèi),創(chuàng)傷是引起人類死亡的第二大原因。雖然建立了區(qū)域性急救體系并且在創(chuàng)傷治療方面有所提高,但是死亡率仍居高不下。創(chuàng)傷所致的凝血障礙約占創(chuàng)傷后死因的40%。急性創(chuàng)傷性凝血?。═rauma induced coagulopathy,TIC)的發(fā)病機制復(fù)雜,涉及多個系統(tǒng)。急性創(chuàng)傷性凝血病并非簡單的消耗性凝血障礙,而是涉及凝血系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)、組織灌注、炎癥反應(yīng)及血管內(nèi)皮功能等多個系統(tǒng)動態(tài)平衡的紊亂。但具體機制仍不明確,

2、存在多種假說。因此,建立急性創(chuàng)傷性凝血病小動物模型有利于對其機制進一步深入研究從而指導(dǎo)臨床。本實驗,我們通過對大鼠進行人為多發(fā)傷,建立了急性創(chuàng)傷凝血病模型,并探討了顱腦外傷(Traumatic brain injury,TBI)后凝血功能異常與銅代謝紊亂的可能關(guān)系。
  方法:
  1、大鼠股動脈插管采血模型的建立:
  SD(Sprague-Dawley,SD)大鼠,無菌條件下分離股動脈,結(jié)扎遠心端、夾閉近心端、剪口

3、、插管、連接三通閥,監(jiān)測血壓及連續(xù)采集動脈血。
  2、TIC模型建立:
  SD大鼠,外科開放氣道,行左側(cè)頸動脈及股動脈插管,持續(xù)監(jiān)測血壓并通過股動脈導(dǎo)管連續(xù)采血。模型制作:使用止血鉗對肝臟中右葉、小腸及右下肢骨骼肌鉗夾,行右側(cè)脛腓骨骨折,合并失血性休克。大鼠處死后損傷組織做 HE(Hematoxylin-eosin,HE)染色觀察病理變化,右下肢正斜位片觀察骨折情況。每隔30min采血一次,進行連續(xù)凝血功能測定及血小板監(jiān)

4、測。
  3、顱腦創(chuàng)傷凝血病模型的建立
  采用自由落體顱腦外傷打擊模型。打擊完畢予頸動脈插管、氣管插管及股動脈插管。每隔30min采血一次,進行連續(xù)凝血功能測定及血小板監(jiān)測。此外,實驗結(jié)束取大鼠腦組織通過HE染色進行組織學(xué)觀察,石墨爐原子吸收光譜法測定血漿中總銅(Cu)。
  結(jié)果:
  經(jīng)股動脈插管可同時實現(xiàn)短時連續(xù)多次采血及血壓監(jiān)測。大鼠行多發(fā)傷處理后,APTT(Activated partial thro

5、mboplastin time,APTT)較0時刻點及空白對照組有明顯延長趨勢,血小板總體呈降低趨勢,PT(Prothrombin time,PT)及INR(International normalized ratio,INR)變化不明顯。HE染色顯示大鼠肝臟、小腸明顯的出血,部分肝細胞呈空泡樣變甚至壞死,骨骼肌纖維斷裂,細胞水腫,少量細胞核消失。大鼠顱腦外傷模型結(jié)果表明,TBI后 APTT延長,血小板計數(shù)減少,且血漿總銅濃度水平降低。

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