絕經后骨質疏松癥腎陰虛證相關基因CLCF1表達的研究.pdf

1、目的:
　　 課題應用RT-PCR技術檢測POP腎陰虛證組、POP腎陽虛證組、POP其他腎虛證組、POP非腎虛證組及正常對照組CLCF1表達水平，通過比較各組間CLCF1表達水平，進一步驗證CLCF1與絕經后骨質疏松癥腎陰虛證的關聯性，為后續(xù)研究絕經后骨質疏松癥腎陰虛證的基因組學機制提供參考。
　　 方法:
　　 隨機選擇福州地區(qū)絕經后骨質疏松癥受試者，通過問卷調查、雙能X線骨密度檢測(Dual energy X

2、-ray bone mineral density testing DXA)及中醫(yī)辨證分型，分為POP腎陰虛證組(32例)、POP腎陽虛證組(26例)、POP其他腎虛證組(43例)和POP非腎虛證組(30例)，另外，選擇健康絕經后婦女為正常組(30例)。分別抽取靜脈血，進行紅細胞裂解，分離出靜脈血中的白細胞，用Trizol一步法提取白細胞中的總RNA，檢測RNA質量后，將樣品RNA逆轉錄為cDNA。將各組的目的基因(CLCF1)和內參基

3、因(GAPDH)進行RT-PCR反應，繪制梯度稀釋DNA標準曲線，將每個樣品的CLCF1的濃度除以GAPDH的濃度，即為此樣品此基因的校正后的相對濃度。最后，SPSS統計，比較各組CLCF1表達水平。
　　 結果:
　　 各組的CLCF1校正后的相對濃度分別為:POP腎陰虛證組:0.0171±0.0109; POP腎陽虛證組:0.0867±0.2881;POP其他腎虛證組:0.1776±0.4895; POP無腎虛證組:

4、0.0672±0.2539;正常對照組:0.1642±0.4290。POP腎陰虛證組與POP腎陽虛證組、POP其他腎虛證組、POP非腎虛證組相比，CLCF1表達水平無統計學意義(P＞0.05)，與正常對照組相比，POP腎陰虛證組CLCF1表達水平顯著下調(P＜0.01);POP腎陽虛證組與POP其他腎虛證組、POP非腎虛證組、正常對照組相比，CLCF1表達水平無統計學意義(P＞0.05); POP其他腎虛證組與POP非腎虛證組、正常對照

5、組比較，CLCF1表達無統計學意義(P＞0.05); POP非腎虛證與正常對照組比較，CLCF1表達無統計學意義(P＞0.05)。
　　 結論:
　　 通過RT-PCR技術比較各組中CLCF1的表達情況，其中僅POP腎陰虛證組與正常對照組相比，CLCF1表達水平顯著下調(P＜0.01)，其余各組間CLCF1表達均無統計學意義。這與前期課題中基因芯片的檢測結果是基本吻合的。進一步證實:絕經后骨質疏松癥腎陰虛證與CLCF1表