低劑量雙酚A不同窗口暴露的生殖和神經(jīng)毒性的研究.pdf

1、內(nèi)分泌干擾物已成為現(xiàn)代生命科學(xué)研究領(lǐng)域的熱門之一，受到了越來越多的人的關(guān)注。內(nèi)分泌干擾物是指一類進(jìn)入機(jī)體后，具有干擾體內(nèi)正常內(nèi)分泌系統(tǒng)物質(zhì)合成、運(yùn)輸、代謝等過程的外源性物質(zhì)，它可激活或者抑制內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能，導(dǎo)致內(nèi)分泌系統(tǒng)的紊亂，并破壞機(jī)體穩(wěn)態(tài)。而雙酚A就是內(nèi)分泌干擾物的代表之一。雙酚A(BPA)學(xué)名2，2-二（4-羥基苯基）丙烷，簡(jiǎn)稱二酚基丙烷，是一種重要的有機(jī)化工原料，主要用來生產(chǎn)聚碳酸酯(PC)、環(huán)氧樹脂、聚砜樹脂等多種高分子材料

2、，從60年代起就被用來生產(chǎn)塑料瓶、幼兒口杯、包裝內(nèi)側(cè)涂層等。BPA廣泛存在于生活當(dāng)中，從礦泉水瓶、塑料制品、醫(yī)用器具、塑料手提袋到食品袋等都有BPA的存在。據(jù)統(tǒng)計(jì)，每年全世界生產(chǎn)大約2700萬噸含有BPA的塑料。BPA作為環(huán)境雌激素的一員，同樣威脅著人類的健康。在多種環(huán)境媒介中均可檢測(cè)到不同濃度BPA的存在，包括水體、土壤、動(dòng)物樣本和人體樣本。所以BPA在公共環(huán)境安全領(lǐng)域得到了各專家學(xué)者的廣泛關(guān)注，現(xiàn)有的關(guān)于BPA的研究多集中在哺乳動(dòng)物

3、生殖方面，且多是高劑量暴露，對(duì)于水生生物低劑量的BPA暴露導(dǎo)致的毒理學(xué)效應(yīng)報(bào)道較少。因此本研究以斑馬魚為模式生物，建立低劑量BPA暴露模型，研究BPA對(duì)于斑馬魚的生殖毒性，為明確BPA的作用機(jī)理和分子機(jī)制提供參考。
　　根據(jù)本團(tuán)隊(duì)之前的研究結(jié)果，1nM的BPA對(duì)斑馬魚具有顯著的生殖毒性，而且與現(xiàn)時(shí)環(huán)境水體的污染程度相當(dāng)，所以本次研究選擇1nM為水體暴毒濃度。根據(jù)斑馬魚發(fā)育階段，選用胚胎期(0-3dpf, day post fert

4、ilization)、幼體期(3-21 dpf)、胚胎幼體期（0-21 dpf;涵蓋胚胎期和幼體期）、性分化期(21-42dpf)四個(gè)暴毒窗口對(duì)斑馬魚進(jìn)行低劑量BPA(1nM)的水體暴露。生殖毒性主要研究F0代性別比例、存活率、體重體長及生長適應(yīng)因子、精巢重量、生殖腺指數(shù)、精子密度、精子總活力、精子活躍活力、精子運(yùn)動(dòng)速度、卵巢精巢的石蠟切片、產(chǎn)卵量及F1代的受精率、畸形率、死亡率、孵化率。神經(jīng)毒性主要研究F0代和F1代社會(huì)交往行為、運(yùn)動(dòng)

5、活力和光暗刺激，以及F1代初級(jí)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元和肌肉的發(fā)育情況。
　　研究結(jié)果表明，BPA暴露對(duì)生殖發(fā)育的影響:BPA具有雌激素效應(yīng)，改變性別比例，促進(jìn)斑馬魚向雌性方向分化，胚胎幼體期暴毒組的性別比例差異顯著。BPA對(duì)F0代生存率無顯著性影響。BPA導(dǎo)致體重體長下降，生長適應(yīng)因子上升，說明BPA可能促使肥胖發(fā)生。BPA暴毒導(dǎo)致精巢重量上升、生殖腺指數(shù)升高、精子密度活力下降，其中胚胎幼體期暴毒組最為顯著，導(dǎo)致精子運(yùn)動(dòng)速度下降。性腺石蠟切片

6、結(jié)果顯示，斑馬魚的卵巢結(jié)構(gòu)未見明顯變化，而精巢內(nèi)精原細(xì)胞和精母細(xì)胞增多，精子減少，說明BPA暴毒抑制了精子的發(fā)生。BPA暴露對(duì)子一代胚胎發(fā)育的影響:各組的產(chǎn)卵量有上升趨勢(shì)，但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;F1代的受精率、畸形率和死亡率沒有顯著性差異，有促進(jìn)胚胎提前孵化的作用，最終孵化率無顯著性差異。BPA暴露對(duì)神經(jīng)行為的影響:各處理組黑暗條件下的社會(huì)交往總時(shí)間未發(fā)生顯著性變化，光照條件下各處理組雄魚的交往總時(shí)間發(fā)生顯著性上升，雌魚胚胎期交往總時(shí)間發(fā)

7、生下降，其他組無顯著性差異，雌魚和雄魚之間的社會(huì)交往總時(shí)間各處理組均有上升趨勢(shì)，其中胚胎期和幼體期有顯著性差異。雄魚的運(yùn)動(dòng)活力幼體期發(fā)生顯著性下降，性分化期發(fā)生顯著性上升，其他組無顯著性差異，光暗刺激實(shí)驗(yàn)中，胚胎期和性分化期的速度出現(xiàn)顯著性上升。雌魚的運(yùn)動(dòng)活力各處理組均發(fā)生顯著性上升，光暗刺激實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異不大。幼魚之間的社會(huì)交往行為未發(fā)生顯著性差異，運(yùn)動(dòng)活力各處理組發(fā)生顯著性上升，光暗刺激試驗(yàn)各處理組的速度也都出現(xiàn)上升趨勢(shì)，說明BPA對(duì)