S100A9在口腔腫瘤生長與增殖中的調(diào)控作用.pdf

1、目的：研究S100A9在涎腺腫瘤及正常涎腺組織中的表達水平，并分析S100A9對SCC-3細胞的增殖和遷移的影響，了解S100A9在口腔腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中可能所起的作用，可能為口腔腫瘤的早期臨床診斷及預(yù)后評估提供新方法。
　　方法：通過收集15例涎腺腫瘤手術(shù)的良性腫瘤標本（多形性腺瘤）及瘤旁正常組織標本，抽提出收集標本組織的總 RNA，逆轉(zhuǎn)錄為 cDNA，再采用實時熒光定量PCR的技術(shù)方法檢測出腫瘤及正常組織中S100A9 mR

2、NA的表達水平。采用RNA干擾技術(shù)，構(gòu)建出S100A9 shRNA，沉默和過表達S100A9，利用大腸桿菌感受態(tài)細胞DH5α進行了轉(zhuǎn)化實驗，使用293T細胞來包裝慢病毒，再使慢病毒載體感染SCC-3細胞。應(yīng)用細胞劃痕實驗來檢測S100A9沉默組和S100A9過表達組分別與對照組相比對SCC-3細胞遷移的影響。應(yīng)用噻唑藍MTT比色實驗來檢測S100A9沉默組和 S100A9過表達組分別與對照組相比對 SCC-3細胞的生長活力和增殖能力的影

3、響。
　　結(jié)果：1.實時熒光定量PCR實驗的結(jié)果顯示：與正常組織相比，15組腫瘤樣本中，有10組腫瘤組織中S100A9 mRNA高表達，5組腫瘤組織中的S100A9 mRNA為低表達，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，p<0.05，15組腫瘤組織中S100A9 mRNA表達水平與正常組有顯著差異，且為高表達。
　　2.細胞劃痕實驗的結(jié)果顯示：在劃痕后24h，S100A9過表達組的SCC-3細胞遷移速度明顯高于對照組，S100A9沉默組的SCC-

4、3細胞的遷移速度與對照組相比，細胞的遷移速度明顯低于對照組細胞的遷移速度。
　　3.噻唑藍MTT比色實驗的結(jié)果顯示：在0h，12h，24h，48h，S100A9過表達組中相對SCC-3細胞數(shù)目均高于對照組，而S100A9沉默組的相對SCC-3細胞數(shù)目明顯低于同一時間下的對照組的細胞數(shù)目。
　　結(jié)論：1. S100A9在涎腺腫瘤中的表達量明顯高于正常涎腺組織，兩組間有明顯差異，說明S100A9可能與口腔腫瘤的發(fā)生有關(guān)。