亞慢性砷暴露對(duì)小鼠腦組織TR表達(dá)的影響.pdf

1、背景：砷是自然界存在的有毒類(lèi)金屬元素，廣泛分布于巖石、土壤和水環(huán)境中。很多研究顯示，砷能引起人類(lèi)及動(dòng)物包括損傷學(xué)習(xí)和記憶功能在內(nèi)的神經(jīng)系統(tǒng)毒性。本課題組前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，砷暴露可顯著抑制腦CaMKⅣ基因、蛋自的表達(dá)及學(xué)習(xí)記憶相關(guān)基因c-Fos，JunB的表達(dá)，并伴有LTM形成抑制以及小鼠的運(yùn)動(dòng)學(xué)習(xí)能力降低。我們推測(cè)砷可能通過(guò)抑制神經(jīng)元CaMKⅣ的表達(dá)，干擾CREB的磷酸化活化，導(dǎo)致記憶蛋白c-Fos，JunB表達(dá)下調(diào)，從而影響LTM形成

2、。那么，砷又是如何抑制CaMKⅣ的表達(dá)呢？
　　 目的：觀察砷對(duì)小鼠腦組織甲狀腺激素受體(TR)基因和蛋白的表達(dá)影響，為闡明砷的神經(jīng)毒作用機(jī)制以及防治砷的神經(jīng)毒性危害提供靶標(biāo)依據(jù)。
　　 方法：SPF級(jí)小鼠50只，按體重將小鼠隨機(jī)分為飲用水對(duì)照組、1ppm As2O3染毒組、2ppm As2O3染毒組、4ppm As2O3染毒組、4ppm As2O3+150mg/kg牛磺酸保護(hù)組。通過(guò)自然飲用含不同濃度As2O3蒸餾水的

3、方式使小鼠染砷，保護(hù)劑是以灌胃方式給予，連續(xù)染毒60天后取腦組織。行為學(xué)試驗(yàn)測(cè)試砷暴露小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，以及用基因芯片技術(shù)和PCR技術(shù)檢測(cè)小鼠腦組織甲狀腺激素受體(TR)基因的差異表達(dá)，并進(jìn)一步用Western blot方法證實(shí)TR蛋白水平表達(dá)。采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件，用單因素方差分析(ANOVA)，比較各染砷組與對(duì)照組間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，兩組間比較用LSD法分析，以P＜0.05表示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著。
　　 結(jié)果：跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4、顯示，與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組小鼠錯(cuò)誤次數(shù)增多，從平臺(tái)跳下的潛伏期縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。暗箱實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組小鼠錯(cuò)誤次數(shù)增多，由明箱進(jìn)去暗箱的潛伏期縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，砷暴露組小鼠的逃避潛伏期明顯長(zhǎng)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)?；蛐酒Y(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，各染砷組小鼠大腦和小腦組織TRβ基因表達(dá)均顯著下調(diào)，尤其4ppm組下調(diào)更明顯(P＜

5、0.05)：而各組之間小鼠大腦和小腦組織TRα基因表達(dá)沒(méi)有差異(P＞0.05)。Real Time PCR定量檢測(cè)結(jié)果顯示，砷染毒組小鼠大腦和小腦組織中TRβ基因相對(duì)表達(dá)量與對(duì)照組相比均明顯下調(diào)(P＜0.05)。Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，染砷組小鼠大腦和小腦組織中TRβ1蛋白表達(dá)量隨著染砷劑量的增加呈現(xiàn)降低趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。并且，抗氧化劑?；撬釋?duì)砷導(dǎo)致TR基因和蛋白表達(dá)下調(diào)有拮抗作用(P＜