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文檔簡介
1、背景:砷是自然界存在的有毒類金屬元素,廣泛分布于巖石、土壤和水環(huán)境中。很多研究顯示,砷能引起人類及動物包括損傷學習和記憶功能在內(nèi)的神經(jīng)系統(tǒng)毒性。本課題組前期實驗結果表明,砷暴露可顯著抑制腦CaMKⅣ基因、蛋自的表達及學習記憶相關基因c-Fos,JunB的表達,并伴有LTM形成抑制以及小鼠的運動學習能力降低。我們推測砷可能通過抑制神經(jīng)元CaMKⅣ的表達,干擾CREB的磷酸化活化,導致記憶蛋白c-Fos,JunB表達下調(diào),從而影響LTM形成
2、。那么,砷又是如何抑制CaMKⅣ的表達呢?
目的:觀察砷對小鼠腦組織甲狀腺激素受體(TR)基因和蛋白的表達影響,為闡明砷的神經(jīng)毒作用機制以及防治砷的神經(jīng)毒性危害提供靶標依據(jù)。
方法:SPF級小鼠50只,按體重將小鼠隨機分為飲用水對照組、1ppm As2O3染毒組、2ppm As2O3染毒組、4ppm As2O3染毒組、4ppm As2O3+150mg/kg?;撬岜Wo組。通過自然飲用含不同濃度As2O3蒸餾水的
3、方式使小鼠染砷,保護劑是以灌胃方式給予,連續(xù)染毒60天后取腦組織。行為學試驗測試砷暴露小鼠的學習記憶能力,以及用基因芯片技術和PCR技術檢測小鼠腦組織甲狀腺激素受體(TR)基因的差異表達,并進一步用Western blot方法證實TR蛋白水平表達。采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件,用單因素方差分析(ANOVA),比較各染砷組與對照組間的統(tǒng)計學差異,兩組間比較用LSD法分析,以P<0.05表示統(tǒng)計學差異顯著。
結果:跳臺實驗結果
4、顯示,與對照組比較,實驗組小鼠錯誤次數(shù)增多,從平臺跳下的潛伏期縮短,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。暗箱實驗結果顯示,與對照組比較,實驗組小鼠錯誤次數(shù)增多,由明箱進去暗箱的潛伏期縮短,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。Morris水迷宮實驗結果顯示,砷暴露組小鼠的逃避潛伏期明顯長于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)?;蛐酒Y果顯示,與對照組相比,各染砷組小鼠大腦和小腦組織TRβ基因表達均顯著下調(diào),尤其4ppm組下調(diào)更明顯(P<
5、0.05):而各組之間小鼠大腦和小腦組織TRα基因表達沒有差異(P>0.05)。Real Time PCR定量檢測結果顯示,砷染毒組小鼠大腦和小腦組織中TRβ基因相對表達量與對照組相比均明顯下調(diào)(P<0.05)。Western blot檢測結果顯示,與對照組相比,染砷組小鼠大腦和小腦組織中TRβ1蛋白表達量隨著染砷劑量的增加呈現(xiàn)降低趨勢,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。并且,抗氧化劑?;撬釋ι閷е耇R基因和蛋白表達下調(diào)有拮抗作用(P<
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