亞慢性砷暴露對小鼠腦組織TR表達的影響.pdf

1、背景：砷是自然界存在的有毒類金屬元素，廣泛分布于巖石、土壤和水環(huán)境中。很多研究顯示，砷能引起人類及動物包括損傷學習和記憶功能在內(nèi)的神經(jīng)系統(tǒng)毒性。本課題組前期實驗結果表明，砷暴露可顯著抑制腦CaMKⅣ基因、蛋自的表達及學習記憶相關基因c-Fos，JunB的表達，并伴有LTM形成抑制以及小鼠的運動學習能力降低。我們推測砷可能通過抑制神經(jīng)元CaMKⅣ的表達，干擾CREB的磷酸化活化，導致記憶蛋白c-Fos，JunB表達下調(diào)，從而影響LTM形成

2、。那么，砷又是如何抑制CaMKⅣ的表達呢？
　　 目的：觀察砷對小鼠腦組織甲狀腺激素受體(TR)基因和蛋白的表達影響，為闡明砷的神經(jīng)毒作用機制以及防治砷的神經(jīng)毒性危害提供靶標依據(jù)。
　　 方法：SPF級小鼠50只，按體重將小鼠隨機分為飲用水對照組、1ppm As2O3染毒組、2ppm As2O3染毒組、4ppm As2O3染毒組、4ppm As2O3+150mg/kg?；撬岜Ｗo組。通過自然飲用含不同濃度As2O3蒸餾水的

3、方式使小鼠染砷，保護劑是以灌胃方式給予，連續(xù)染毒60天后取腦組織。行為學試驗測試砷暴露小鼠的學習記憶能力，以及用基因芯片技術和PCR技術檢測小鼠腦組織甲狀腺激素受體(TR)基因的差異表達，并進一步用Western blot方法證實TR蛋白水平表達。采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件，用單因素方差分析(ANOVA)，比較各染砷組與對照組間的統(tǒng)計學差異，兩組間比較用LSD法分析，以P＜0.05表示統(tǒng)計學差異顯著。
　　 結果：跳臺實驗結果

4、顯示，與對照組比較，實驗組小鼠錯誤次數(shù)增多，從平臺跳下的潛伏期縮短，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。暗箱實驗結果顯示，與對照組比較，實驗組小鼠錯誤次數(shù)增多，由明箱進去暗箱的潛伏期縮短，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。Morris水迷宮實驗結果顯示，砷暴露組小鼠的逃避潛伏期明顯長于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)?；蛐酒Y果顯示，與對照組相比，各染砷組小鼠大腦和小腦組織TRβ基因表達均顯著下調(diào)，尤其4ppm組下調(diào)更明顯(P＜

5、0.05)：而各組之間小鼠大腦和小腦組織TRα基因表達沒有差異(P＞0.05)。Real Time PCR定量檢測結果顯示，砷染毒組小鼠大腦和小腦組織中TRβ基因相對表達量與對照組相比均明顯下調(diào)(P＜0.05)。Western blot檢測結果顯示，與對照組相比，染砷組小鼠大腦和小腦組織中TRβ1蛋白表達量隨著染砷劑量的增加呈現(xiàn)降低趨勢，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。并且，抗氧化劑?；撬釋ι閷е耇R基因和蛋白表達下調(diào)有拮抗作用(P＜