脊髓損傷后不同時期移植人臍帶間充質(zhì)干細胞的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 觀察大鼠脊髓損傷后不同時期局部移植人臍帶間充質(zhì)干細胞(humanumbilical cord mesenchymal stem cells，nUCMSCs)修復脊髓損傷的效果，探討hUCMSCs局部移植治療脊髓損傷(spianl cord injury SCI)的最佳移植時機。
　　 方法：
　　 雌性Wistar大鼠80只，隨機分為A、B、C、D組，每組20只，以ImpactorModel-Ⅱ打擊

2、器制備脊髓胸10(T10)損傷模型。A組為單純損傷組、B組損傷后3d移植hUCMSCs、C組損傷后1w移植hUCMSCs、D組損傷后3w移植hUCMSCs，分別于造模后24h、移植前1d及移植后8w(A組與D組損傷后相應時間點相同)每周對各組大鼠后肢功能進行行為學評分(BBB評分)；移植后8w免疫組化染色觀察移植細胞的存活、分化和血管再生情況，10w時用生物素葡聚糖胺(biotin dextran amine，BDA)示蹤皮質(zhì)脊髓束(c

3、orticospinal tract，CST)觀察軸突的再生情況。
　　 結果：
　　 SCI后24h各組間大鼠BBB評分無顯著性差異(P>0.05)，損傷后3w移植hUCMSCs組在移植前和移植后1w與單純損傷組相應時間點的BBB評分無顯著性差異(P>0.05)，移植后2w起各時間點評分均明顯高于單純損傷組相應時間點，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；單純損傷組在SCI后9w是到達平臺期，與實驗結束時相比差異無統(tǒng)計學意

4、義(P>0.05)。移植各組移植后BBB評分逐漸上升，后一個時間點與同組前一時間點比較差異有顯著性意義(P<0.05)，移植后6w開始損傷后1w移植hUCMSCs組的BBB評分明顯高于損傷后3d移植hUCMSCs組和損傷后3w移植hUCMSCs組(P<0.05)。免疫組化染色觀察到單純損傷組脊髓中未見Brdu陽性細胞，損傷區(qū)血管形態(tài)欠完整，未見新生血管；
　　損傷周圍星形膠質(zhì)細胞大量增生，細胞肥大、突起增多、排列不規(guī)則，形成膠質(zhì)

5、瘢痕；未見BDA標記的皮質(zhì)脊髓束通過損傷區(qū)。損傷后3d移植hUCMSCs組、損傷后1w移植hUCMSCs組和損傷后3w移植hUCMSCs組脊髓中均有Brdu陽性標記的細胞存活，損傷后1w移植hUCMSCs組和損傷后3w移植hUCMSCs組中細胞數(shù)量明顯多于損傷后3d移植hUCMSCs組，但三組中均未見到移植細胞向神經(jīng)元或神經(jīng)膠質(zhì)樣細胞分化；損傷后3d移植hUCMSCs組和損傷后3w移植hUCMSCs組損傷周圍的星形膠質(zhì)細胞較單純損傷組減

6、少，但排列仍欠規(guī)則；損傷后1w移植hUCMSCs組損傷周圍星形膠質(zhì)細胞形態(tài)趨于正常，排列規(guī)則，且有大量星形膠質(zhì)細胞通過損傷區(qū)，血管再生數(shù)目及通過損傷區(qū)的皮質(zhì)脊髓束神經(jīng)纖維也明顯對于損傷后3d移植hUCMSCs組和損傷后3w移植hUCMSCs組。
　　 結論：
　　 SCI后1w局部移植的hUCMSCs不僅能長期存活，還能明顯抑制膠質(zhì)瘢痕形成，改善局部微循環(huán)，從而促進軸突再生，改善實驗大鼠后肢運動功能。提示與3d和3w相比