IL-22對大鼠小體積移植肝保護作用的研究.pdf

1、目的：建立大鼠全肝移植模型、50％減體積肝移植模型和30%小體積肝移植模型，探究IL-22在不同體積肝移植模型中的表達；建立30%小體積肝移植模型，探究IL-22對小體積移植肝的保護作用。
　　方法：⑴選擇雄性SD大鼠，建立大鼠全肝移植模型（n=30），50%減體積肝移植模型（n=30）和30%小體積肝移植模型（n=30），記錄術中供、受體手術時間，冷缺血時間、無肝期及下腔靜脈阻斷時間，觀察大鼠7天內生存情況。⑵建立全肝移植模型全

2、肝移植組（n=48），50%肝移植模型50%肝移植組（n=48）和30%肝移植模型30%肝移植組（n=48），每組分別在術后6小時、1天、3天和7天處死6只大鼠，檢測血清ALT、AST水平，計算肝臟再生率，對肝臟組織進行HE染色及免疫組化PCNA染色，使用 RT-PCR檢測IL-22mRNA；使用Western blot法檢測IL-22與STAT3。⑶建立大鼠30%小體積肝移植模型，隨機分為實驗組（n=56），術中注射大鼠重組 IL-2

3、2；對照組（n=56），術中注射生理鹽水。術中記錄供、受體手術時間，冷缺血時間，無肝期和下腔靜脈阻斷時間，在術后6小時，1天，3天和7天四個時間點，每組處死5只大鼠，檢測血清ALT、AST，計算肝臟再生率，對肝組織進行HE染色及免疫組化PCNA染色，兩組隨機選取8只術后大鼠用于生存率比較，觀察周期為7天。
　　結果：①三組術中記錄的各項指標未見統(tǒng)計學差異，全肝移植組、50%肝移植組和30%肝移植組7天生存率分別為93.3%（14/

4、15），86.7%（13/15）和46.7%（7/15）。②在術后6小時、1天兩個時間點30%肝移植組血清ALT、AST水平顯著高于50%肝移植組（P<0.05）；HE染色提示30%肝移植組肝臟組織結構損傷大于另外兩組；肝再生率分析顯示30%肝移植組在各個時間點均低于50%肝移植組（P<0.01）；50%肝移植組 PCNA陽性細胞率提示術后1天肝細胞再生迅速，而30%肝移植組術后3天開始升高；在50%肝移植組IL-22 mRNA在術后1

5、天大量增加，高于另外兩組（P<0.01），在30%肝移植組，術后第3天IL-22 mRNA表達繼續(xù)增多，并且高于另外兩組（P<0.01），術后第7天仍保持較高水平且高于另外兩組（P<0.01）。Western blot檢測顯示，50%肝移植組的IL-22在術后6小時、1天時表達逐漸增高，30%肝移植組術后1天開始增高，至術后7天，仍有較高的表達；STAT3在術后7天內的表達與對照組相比較基本無變化；p-STAT3在50%肝移植組術后6小

6、時開始有較高表達，在30%肝移植組，術后6小時可見表達，隨后表達增多，在術后第7天，仍可見較高程度的表達。③術中記錄相關信息未見統(tǒng)計學差異；術后1天實驗組血清ALT、AST水平低于對照組（P<0.05）；HE染色提示實驗組在術后1天肝臟組織結構開始恢復；實驗組的肝臟再生率均高于對照組；PCNA提示，實驗組肝細胞再生較早，術后1天陽性細胞率顯著高于對照組（P<0.05）。實驗組大鼠7天生存率為62.5%（5/8），對照組大鼠7天生存率為3

7、7.5%（3/8）。
　　結論：⑴大鼠肝移植以及部分肝移植模型是一個難度較高的模型，通過熟練顯微手術操作，注重手術細節(jié)，可以獲得較理想的手術成功率與生存率，本研究中，各組之間術中供體手術時間、移植肝冷缺血時間、受體無肝期、受體肝下下腔靜脈阻斷時間以及受體手術時間無統(tǒng)計學差異，模型趨于穩(wěn)定，可以用于進一步的研究。⑵50%大鼠部分肝移植模型組 IL-22的表達要早于30%肝移植組；同時肝細胞的損傷程度與肝細胞再生的變化趨勢與IL-22