雞毒霉形體黏附素相互作用蛋白的分離及鑒定.pdf

1、分類號華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文雞毒霉形體薪附素相互作用蛋白的分離及鑒定IsolationandIdentifieationofMycoPlasmaGallisePtieumAdhesinInteractingProteins研究生:胡福利指導老師:彭秀麗副教授專業(yè):動物遺傳育種與繁殖研究方向:分子抗病育種獲得學位名稱:農(nóng)學碩士獲得學位時間:2009年6月華中農(nóng)業(yè)大學動物科技學院二00九年六月雞毒霉形體勃附素相互作用蛋自的分離及鑒定4.1

2、細胞膜蛋白提取及VOPBA分析.......................................................……194.2氣管膜蛋白的GSTPull一Down分析..................................................……204.3相互作用蛋白的質(zhì)譜分析.............................……，.......................

3、.......……204.4APoA一I的抗原決定簇預測.................................................................……21第三章APOA一I基因的克隆表達及與pMGAI.2相互作用研究...........................……221前言..........................................................

4、......................................................……222實驗材料和方法........................................................................，……222.1實驗材料......................................................................

5、..........................……222.1.1主要儀器....................................................................................……222，1.2主要試劑...............................................................……222.1.3主要溶液的配制.....

6、...................................................................……232.2試驗方法二，，二，.…，……，..……，.，.，，.，.，，二，.，.，二，.……，.....……，............................……242.2.1雞載脂蛋白基因cDNA的合成.............................................

7、...……242.2.2ApoA一I基因的克隆載體構建...................................................……262.2.3ApoA一I基因的原核表達載體構建...........................................……282.2.4pGEX一KG一APoA一I可溶性表達條件的優(yōu)化............................……302.2.5融合蛋

8、白的純化........................................................................……302.2.6病毒鋪覆蛋白印跡分析............................................................……312.2.7APoA一I的真核載體構建及表達........................................

9、.......……313結果與分析.......................................................................................……，....……333.1APoA一I基因的克隆與鑒定....................................................................……333.1.1氣管RNA的提取...

10、...................................................................……333.1.2RTPCR擴增結果......................................................................……333.1.3重組質(zhì)粒的鑒定.................................................

11、.......................……333.1.4重組表達質(zhì)粒的鑒定................................................................……343.1.5融合蛋白的表達與鑒定.，.，…，............……，.................................……353.1.6可溶性融合蛋白表達條件的優(yōu)化與純化................

12、................……363.1.7真核重組質(zhì)粒在細胞中的表達................................................……404討論................................................................................................................……414.1重組載體的構建.