艾葉化學成分的提取、分離與含量測定研究.pdf

1、目的：通過對艾葉中總黃酮成分進行提取，并建立含量測定方法；以及對艾葉中的黃酮單體化合物及其他化學成分進行提取、分離、結構鑒定，為進一步系統(tǒng)研究艾葉的化學成分及藥理毒理作用提供依據(jù)，為艾葉有效化學成分的大量提取制備和深入開發(fā)奠定基礎。
　　 方法：本研究是在查閱大量相關文獻的基礎上，通過對文獻報道的艾葉化學成分的結構特點和化學性質進行綜合分析后擬定實驗方法。首先以乙醇浸漬法提取艾葉中的總黃酮成分，濃縮成浸膏。將浸膏進行處理獲得預試

2、品，并制成溶液，用亞硝酸鈉和硝酸鋁顯色，于紫外分光光度計下測定吸光度值，進而計算出艾葉樣品中總黃酮含量。對顯色劑的加入時間、溶液pH值等影響因素進行分析，選擇最佳試驗方法并繪制標準曲線，并對此方法進行方法學考察，從而建立艾葉中總黃酮含量測定方法。然后再以不同極性的溶劑(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)對總黃酮浸膏進行萃取分離。其中對艾葉的乙酸乙酯層萃取物分別采用硅膠柱層析，凝膠柱層析Sephadex LH-20，凝膠滲透柱色譜Toyopeal

3、 HW-40，制備薄層色譜以及制備高效液相色譜等方法進行分離純化，得到單體化合物。運用1H-NMR，13C-NMR和二維核磁共振等現(xiàn)代波譜技術對單體化合物的結構進行綜合解析和鑒定。
　　 結果：通過影響因素和相關方法學考察，確定了艾葉中總黃酮含量測定方法，建立標準曲線為：A=0.0118C+0.0133，r=0.9991，在5.800～58.000μg/ml范圍線性關系良好。該含量測定方法準確度、精密度、重現(xiàn)性良好，且在30mi

4、n內具有良好的穩(wěn)定性。同時，從艾葉的乙酸乙酯提取部位中共分離得到4個單體化合物，通過鑒定，其結構分別為5，7，3’-三羥基-3，6，14’-三甲氧基黃酮醇(1)，5，7-二羥基-3，3’，6，4’-四甲氧基黃酮醇(2)，東莨菪內酯(3)，對羥基苯甲醛(4)。其中化合物(1)和(2)為黃酮醇類化合物，化合物(3)為香豆素類，化合物(4)為芳香類小分子化合物。經(jīng)過文獻檢索，化合物(1)和(2)為首次從艾葉中分離得到。
　　 結論：本

5、研究利用亞硝酸鈉和硝酸鋁顯色原理，紫外分光光度法測定而建立了艾葉中總黃酮的含量測定方法，該方法簡便快速、準確穩(wěn)定、重現(xiàn)性好。在此基礎上采用多種天然藥物化學提取分離方法，繼續(xù)對艾葉中總黃酮及其他化學成分進行分離純化，并利用現(xiàn)代波譜技術對所分離化合物進行結構鑒定，最終確定4種單體化合物。對比文獻，本研究使用的方法更具有可操作性，與傳統(tǒng)的醇一水系統(tǒng)提取方法相比，更為準確有效。本研究中所提取分離的化合物(1)和(2)為黃酮醇類化合物，且為首次從