花粉和花粉管質(zhì)膜鈣離子和鉀離子通道在花粉萌發(fā)和花粉管生長調(diào)節(jié)中的作用.pdf

1、首先經(jīng)反復(fù)摸索培養(yǎng)介質(zhì)成分及培養(yǎng)條件,建立了簡便易行的擬南芥花粉體外萌發(fā)方法.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,Ca<'2+>、K<'+>、H<,3>BO<,3>、pH等多種影響因子都對擬南芥花粉萌發(fā)和花粉管生長有顯著影響.在所觀測的實(shí)驗(yàn)條件范圍內(nèi),培養(yǎng)介質(zhì)中的最適Ca<'2+>、K<'+>、H<,3>BO<,3>的濃度分別為10、1～10、和1.6mmol/L,而最適pH約為6.0.在此條件下,將擬南芥花粉在25℃和100﹪相對濕度條件下持續(xù)培養(yǎng)6hr,

2、花粉萌發(fā)率可達(dá)80﹪以上,而花粉管平均長度可達(dá)103～200μm.利用Ca<'2+>通道抑制劑（La<'3+>或Gd<'3+>）或微絲解聚劑（細(xì)胞松弛素D、細(xì)胞松弛素B、或latrunculinA）處理都顯著地抑制花粉萌發(fā)和花粉管生長,而且微絲解聚劑的抑制作用表現(xiàn)出對胞外Ca<'2+>的依賴性,說明微絲解聚劑對花粉萌發(fā)和花粉管生長的抑制可能是通過影響胞外Ca<'2+>內(nèi)流起作用的.利用激光共聚焦顯微術(shù)對花粉原生質(zhì)體或花粉管胞質(zhì)自由Ca<

3、'2+>水平的觀測結(jié)果證明,微絲解聚劑處理引起胞質(zhì)自由Ca<'2+>水平的顯著增高,而Ca<'2+>通道抑制劑或微絲穩(wěn)定劑卻能抑制微絲解聚劑的作用.運(yùn)用膜片鉗單通道記錄方法對花粉原生質(zhì)體質(zhì)膜Ca<'2+>電流信號(hào)的觀測及分析結(jié)果表明,擬南芥花粉質(zhì)膜上存在一種電導(dǎo)為7.0pS的超極化激活的內(nèi)向Ca<'2+>通透性通道,微絲解聚劑處理可引起該通道開放幾率的顯著增加,而微絲穩(wěn)定劑卻能阻斷微絲解聚劑激活Ca<'2+>通道的作用.在生長中的花粉管