透明顫菌血紅蛋白基因在短小芽孢桿菌中的表達.pdf

1、血紅蛋白基因能能使低氧條件下細胞的生長和蛋白質的合成速度不會受到太大的影響，并且在一定條件下還能促進目的基因的表達。本研究將透明顫菌血紅蛋白基因成熟肽編碼區(qū)序列分別與枯草芽孢桿菌的P43雙啟動子和短小芽孢桿菌堿性蛋白酶啟動子wBp連接，重組成融合基因，然后利用大腸桿菌-枯草芽孢桿菌穿梭載體pSUGv4分別構建組成型表達質粒pSUP43vgb和pSUwBpvgb。將表達質粒分別轉化短小芽孢桿菌Bacillus pumilus UN-31-

2、C-11、枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis WB600和大腸桿菌Escherichia coli BL21(DE3)，經SDS-PAGE和CO差異光譜檢測表明融合基因在3種宿主菌中均得到了表達。融合基因的表達使宿主菌模擬通氧充分或者低氧培養(yǎng)條件下均表現(xiàn)出相對于對照菌株的生長優(yōu)勢。在短小芽孢桿菌中，表達質粒使重組菌株在低氧條件下的生長量在生長后期超對照菌株20％以上，而且血紅蛋白的表達促進了短小芽孢桿菌蛋白酶基因的表達和分泌