二甲雙胍通過(guò)上調(diào)PEDF抑制前列腺癌的增殖、轉(zhuǎn)移和生長(zhǎng).pdf

1、背景：近年來(lái)，流行病學(xué)調(diào)查研究表明二甲雙胍能夠抑制包括前列腺癌在內(nèi)的多種腫瘤的生長(zhǎng)，然而它的抗癌作用機(jī)制仍未明確。我們想要了解二甲雙胍是如何影響前列腺癌細(xì)胞的生物學(xué)功能，色素上皮衍生因子的表達(dá)是否發(fā)生變化，以及兩者之間是否有聯(lián)系。
　　實(shí)驗(yàn)方法：在細(xì)胞水平上，CCK8實(shí)驗(yàn)和平板克隆形成實(shí)驗(yàn)用于檢測(cè)兩種前列腺癌細(xì)胞LNCaP和PC3的細(xì)胞增殖情況;細(xì)胞凋亡以及細(xì)胞周期檢測(cè)分別借助于annexinⅤ-APC/PI凋亡檢測(cè)試劑盒和細(xì)胞周

2、期檢測(cè)試劑盒;在檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲的功能時(shí)，劃痕修復(fù)實(shí)驗(yàn)(PC3細(xì)胞的遷移)Boyden小室(LNCaP的遷移;PC3和LNCaP細(xì)胞的侵襲)分別派上用場(chǎng)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，我們使用三種不同的二甲雙胍濃度(0.625、2.5和10mM)來(lái)處理LNCaP和PC3兩種前列腺癌細(xì)胞。同時(shí)，還建立了前列腺癌小鼠模型，并在模型小鼠身上檢測(cè)了二甲雙胍對(duì)前列腺腫瘤生長(zhǎng)的影響作用。最后，通過(guò)采用熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)色素上皮衍生因子mRNA的表達(dá)情況，we

3、stern blot和免疫組化水平分別檢測(cè)色素上皮衍生因子在藥物作用后的變化。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：不同濃度的二甲雙胍處理LNCaP和PC3兩種前列腺癌細(xì)胞后，癌細(xì)胞的增殖和克隆形成作用受到藥物的顯著抑制，并且這種抑制作用具有時(shí)間依賴性和濃度依賴性;在檢測(cè)藥物作用后前列腺癌細(xì)胞的凋亡水平和細(xì)胞周期變化時(shí)，我們發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞的凋亡均明顯高于對(duì)照組，而細(xì)胞周期卻沒(méi)有發(fā)生有意義的變化。二甲雙胍還能顯著抑制LNCaP和PC3細(xì)胞的遷移和侵襲作用，

4、并且這種作用發(fā)生在藥物作用48小時(shí);當(dāng)使用低劑量和高劑量的二甲雙胍分別治療前列腺癌模型小鼠時(shí)，我們還發(fā)現(xiàn)與生理鹽水組相比，二甲雙胍組能夠顯著抑制PC3腫瘤的生長(zhǎng)。同時(shí)檢測(cè)色素上皮衍生因子在此過(guò)程中的變化時(shí)，我們還發(fā)現(xiàn)無(wú)論是在前列腺癌細(xì)胞內(nèi)，還是在腫瘤組織內(nèi)，二甲雙胍都能夠顯著增加色素上皮衍生因子的表達(dá)。
　　結(jié)論：二甲雙胍能夠顯著抑制LNCaP和PC3細(xì)胞的增殖作用，因其不引起細(xì)胞周期的變化，所以這種增殖抑制作用可能與藥物誘導(dǎo)前列