DACH1抑制舌鱗狀細胞癌生長及轉移的研究.pdf

1、本文對DACH1抑制舌鱗狀細胞癌生長及轉移進行了研究。本研究分為兩個部分：
　　第一部分：檢測腫瘤抑制基因DACH1在人舌鱗狀細胞癌中的表達。
　　目的：探討腫瘤抑制基因（Dachshund homolog1，DACH1）在人舌鱗狀細胞癌（Tongue squamous cell carcinoma，TSCC）中發(fā)揮的作用。
　　方法：收集2011年—2013年青島大學附屬醫(yī)院51例TSCC住院患者的腫瘤標本。患者按照

2、年齡、性別、腫瘤臨床分期、組織類型、分化程度、有無淋巴結轉移分類。所有患者術前均未行放療、化療及其他干預治療，并同期行頸部淋巴結清掃術。免疫組織化學技術檢測DACH1蛋白在TSCC及對應癌周正常組織中的表達，并結合相關臨床病理參數(shù)進行綜合分析。Real time RT-PCR及Western Blot方法檢測9例新鮮舌鱗癌及癌周正常組織中DACH1表達情況。
　　結果：免疫組織化學結果表明，約70.6％（36/51）TSCC原發(fā)灶

3、中低表達DACH1（P＜0.05）；DACH1的低表達與腫瘤分化差，臨床分期晚及淋巴結轉移成正相關（P＜0.05）。Real time RT-PCR及Western Blot檢測結果顯示DACH1mRNA及蛋白質在TSCC表達均低于癌周正常組織（P＜0.01）。
　　結論：DACH1在TSCC中呈低表達，DACH1低表達與腫瘤分化差，臨床分期晚及轉移相關，提示DACH1可能成為TSCC抗腫瘤藥物的治療有效靶點。
　　第二部分

4、：DACH1基因過表達對SCC-25細胞增殖、凋亡、遷移及侵襲轉移的影響。
　　目的：檢測DACH1基因過表達對舌鱗癌SCC-25細胞增殖、凋亡、遷移及侵襲轉移的影響。
　　方法：Western Blot分別檢測舌鱗癌細胞系 CAL-27、Tca8113及 SCC-25中 DACH1的表達。構建慢病毒過表達載體轉染舌鱗癌細胞株SCC-25，篩選轉染成功的細胞分為實驗組、陰性對照組、空白對照組。用 MTT、克隆生成實驗檢測 D

5、ACH1過表達對細胞增殖的影響；Transwell小室及粘附實驗檢測DACH1過表達對細胞遷移、侵襲、轉移能力的影響；流式細胞術檢測DACH1過表達對細胞凋亡的作用。
　　結果：DACH1在SCC-25細胞中表達較CAL-27、Tca8113細胞系顯著降低（P＜0.05），過表達DACH1于SCC-25細胞可顯著抑制其增殖活性及克隆形成能力，同時抑制癌細侵襲及轉移，誘導SCC-25細胞凋亡，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。<