人工養(yǎng)殖菲牛蛭（Poecilobdella manillensis Lesson，1842）抗凝血活性物質含量動態(tài)變化研究.pdf

1、本論文主要研究了在人工養(yǎng)殖條件下，不同時期的菲牛蛭體內抗凝血物質含量的動態(tài)變化情況，同時優(yōu)化了菲牛蛭活體、干體、唾液腺分泌物中的抗凝血活性物質的提取方法和檢測方法。 1．由于菲牛蛭抗凝血活性物質提取方法的多樣性，我們選擇了一些具有代表性的方法(蒸餾水直接提取、有機溶劑去除雜質蛋白、鹽析等方法)進行提取以體外抗凝血活性為指標，通過定性(凝血酶直接滴定法)和定量(ChromonymTH為生色底物的比色法)的方法檢測后，選定了最適合提

2、取抗凝血活性物質的方法。同時優(yōu)化了提取工藝和檢測方法。 2．人工養(yǎng)殖條件下，由于菲牛蛭取食機會比較多，所以菲牛蛭的生長動態(tài)曲線，類似于連續(xù)生長動態(tài)曲線。在不同的養(yǎng)殖時期，隨著菲牛蛭年齡的增加，每條菲牛蛭體內的抗凝血物質含量逐漸增加，但增長速度比菲牛蛭體重增加速度要低，因此單位質量菲牛蛭體內的抗凝血物質含量反而逐漸減少。由于菲牛蛭體內的抗凝血物質含量在前三個月增長速度比較快，所以考慮到養(yǎng)殖成本，提取抗凝血物質的菲牛蛭應該最好是三月

3、齡以上的菲牛蛭。 3．菲牛蛭是一種重要的中藥材，在加工菲牛蛭時候，一般采取直接曬干的方法，而本實驗研究結果顯示，菲牛蛭體內抗凝血活性物質含量在曬干過程中會急劇下降，所以如果是利用菲牛蛭提取抗凝血物質時候，應該直接利用菲牛蛭的活體進行快速處理，而不要采取曬干的方法進行處理。 4．菲牛蛭體內的抗凝血物質大多分布在頭部，當吸取血液后，會有一小部分抗凝血物質隨體液流到全身，這導致空腹時候的菲牛蛭和飽食時候的菲牛蛭的尾部抗凝血物質含量不一

4、樣。在空腹時候，菲牛蛭尾部抗凝血物質含量比較低；而飽食時候，菲牛蛭尾部抗凝血物質含量顯著高于空腹時候(P<0.05)。 5．菲牛蛭吸取血液后，會有一部分抗凝血物質隨吸取的血液流到全身，利用一種特殊的誘吐劑處理后，使菲牛蛭將體內部分抗凝血物質分泌出來，再進行高效提取，結果提取的抗凝血活性物質含量也比較高，這樣就得到一種既能夠取出這一部分抗凝血物質，又能夠不處死菲牛蛭的方法，可以對菲牛蛭進行重復利用，可以大大緩解菲牛蛭的供求矛盾，保