磁共振灌注成像ASL與DSC法在評價膠質瘤級別、微血管密度和Ki-67標記指數中的應用研究.pdf

1、目的：
　　腦膠質瘤為成人最常見的顱內原發(fā)性惡性腫瘤，其惡性程度高、侵襲性強、術后易復發(fā)。不同級別膠質瘤的臨床病程和治療手段與腫瘤級別密切相關。腫瘤的快速生長依賴于充足的血液供應，從而導致了新生血管生成。腫瘤新生血管生成是判斷星型細胞瘤生物學侵襲性的最重要因素。目前，多數研究通過查數血管數量或微血管密度（microvessel density，MVD）來評價膠質瘤新生血管生成程度。惡性腫瘤的腫瘤細胞常具有較高的增殖潛力，腫瘤細胞的

2、增殖潛力是影響腫瘤預后的重要因素。Ki-67標記指數(ki-67 labeling index，Ki-67 LI)是反映腫瘤細胞增殖潛力的最可靠生物學標記物。因此，術前準確的評價膠質瘤級別、微血管密度和Ki-67標記指數對臨床上治療方案的選擇、腫瘤預后的評價具有非常重要的意義。
　　動態(tài)磁敏感對比增強(dynamic susceptibility contrast-enhanced imaging，DSC)是臨床上最主要的磁共振灌

3、注方法，已有多數研究表明DSC有助于評價膠質瘤級別、微血管密度。動脈自旋標記技術(arterial spin labeling，ASL)是一項新穎的磁共振灌注方法，它不使用對比劑，以磁化標記的動脈血作為內源性標記物。目前，ASL技術在膠質瘤中的應用仍主要處于初步臨床和實驗研究階段，相關報道不多。本研究旨在探討磁共振灌注成像ASL與DSC法在評價膠質瘤級別、微血管密度和Ki-67標記指數中的應用價值。
　　方法：
　　收集20

4、12年12月至2014年9月間本院原發(fā)膠質瘤病例38例。所有病例均首次診斷為膠質瘤;入組前未接受手術及放化療等治療;術前一周完成顱腦常規(guī)MRI及磁共振灌注成像ASL、DSC檢查，術后經組織病理學證實為膠質瘤。膠質瘤的組織病理學分級依據世界衛(wèi)生組織2007年中樞神經系統(tǒng)腫瘤分類方法。所有患者均簽署了知情同意書。磁共振灌注成像ASL法采用脈沖式動脈自旋標記(pulsed arterial spin labeling，PASL)技術。 DSC

5、法采用單次激發(fā)梯度回波-平面回波序列(GRE-EPI)序列。將采集的原始數據導入Siemens后處理工作站，用Perfusion軟件包處理獲得DSC法的腦血流量(cerebral blood f low, CBF)圖、腦血容量(cerebral blood volume，CBV)圖。用隨機軟件處理獲得ASL法的CBF圖。觀測所得各組灌注圖，并結合常規(guī)MR平掃及增強掃描圖像，避開腫瘤內出血、壞死囊變區(qū)，選取腫瘤實性部分最大血流灌注區(qū)設置感

6、興趣區(qū)，同時取同層面對側灰質作為對照，并測量相應的CBF、CBV值。每個感興趣區(qū)測量3次，求平均值，然后分別計算其比值，得出標準的灌注參數如:相對腦血容量(relative cerebral bloodvolume，rCBV)，相對腦血流量(relative cerebral blood f low, rCBF)。
　　Ki-67檢測用Ki-67抗原的單克隆抗體MIB-1(Dako S.A.，Glostrup，Denmark)對膠

7、質瘤組織切片進行免疫組化染色。染色后的膠質瘤組織切片由兩名有經驗的神經病理學醫(yī)師評價。凡是細胞核著色的膠質瘤細胞均被認為是陽性，Ki-67標記指數(ki-67 labeling index，Ki-67 LI)認定為陽性細胞占所有查數細胞的百分比。MVD檢測用血管內皮細胞特定的CD34抗原的單克隆抗體clone QBEND/10(BioGenex，San Ramon，Calif)對腫瘤組織切片進行免疫組化染色。數字圖像由顯微鏡(BX51;

8、Olympus)和數字照相機(DP50-CU; Olympus)獲得，一個放大400倍的高倍鏡視野用于生成光學放大圖像。在每一個樣本上選擇3個獨立的區(qū)域，查數并記錄每一個高倍鏡視野下的MVD值并計算平均值。MVD的查數方法依照Weidner[24]法。應用SPSS17.0軟件包，計量資料用均數±標準差((X)±s)表示。首先對膠質瘤各灌注參數值進行正態(tài)分布及方差齊性檢驗(Welch test)。膠質瘤的ASL、DSC各灌注參數與組織病理

9、學參數間的相關關系采用Pearson相關分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果：
　　所有用于組織病理學分析的膠質瘤組織均經手術獲得，并最終診斷為膠質瘤，其中包括膠質母細胞瘤（Ⅳ級）15例，間變性星形細胞瘤（Ⅲ級）7例，間變性少突星形細胞瘤（Ⅲ級）3例，星形細胞瘤（Ⅱ級）9例，彌漫性星形細胞瘤（Ⅱ級）2例，少突膠質細胞瘤（Ⅱ級）2例。膠質瘤T1WI上多呈低信號，T2WI上呈高信號，腫瘤周圍常伴有長T1長T2信號水腫

10、影。增強掃描后低級別膠質瘤無強化或僅見輕度強化，高級別膠質瘤則呈明顯強化，腫瘤內常見斑片狀無強化的囊變壞死區(qū)。在ASL、DSC灌注圖上低級別膠質瘤多呈低灌注，高級別膠質瘤多呈高灌注。高級別膠質瘤ASL-CBF、DSC-rCBV、DSC-rCBF值均明顯高于低級別膠質瘤，有統(tǒng)計學差異，P＜0.05。在膠質瘤ASL、DSC各灌注參數值與MVD、Ki-67 LI的Pearson相關性分析中DSC-rCBF, DSC-rCBV, ASL-rCB