面神經(jīng)損傷干細(xì)胞移植修復(fù)免疫調(diào)節(jié)機制研究.pdf

1、目的：面神經(jīng)(FN，facial nerve)損傷可能由外傷或醫(yī)源性損傷造成，患者的面部形態(tài)及相關(guān)功能發(fā)生改變，目前常采用顯微外科技術(shù)以恢復(fù)面神經(jīng)的連續(xù)性，但功能恢復(fù)不甚滿意。近年來的研究表明免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)之間存在著相互作用，CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)的獲得性免疫反應(yīng)在面神經(jīng)損傷后的面運動神經(jīng)元活性維持中起重要作用。同時大量研究表明，干細(xì)胞在周圍神經(jīng)修復(fù)過程中具有神經(jīng)保護和促進軸突再生的作用，其免疫調(diào)節(jié)功能成為一個重要的研究方向。本研究探索

2、了SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(SDBMS Cs)對面神經(jīng)損傷后CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)的獲得性免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)機制，尤其是對Th17亞群比例的調(diào)節(jié)作用，以及對保護面神經(jīng)核內(nèi)面運動神經(jīng)元的作用。
　　方法：本研究分為4個部分，分別為：(1)觀察SDBMSCs在體外傳代培養(yǎng)的形態(tài)、生長情況，選取適用于面神經(jīng)損傷處局部注射的細(xì)胞;(2)ELISA法分別測定Blank、SDBMSCs、FN、FN+SDBMSCs組培養(yǎng)72小時的上清液中TGF-β1、

3、IL-6、HGF、iNOS、PGE2的水平;(3)建立SD大鼠面神經(jīng)損傷/未損傷與SDBMSCs局部注射/PBS局部注射的模型，術(shù)后第9天比較不同實驗組雙側(cè)頸部引流淋巴結(jié)內(nèi)Th17亞群比例;(4)建立SD大鼠面神經(jīng)損傷SDBMSCs局部注射/PBS局部注射的模型，術(shù)后第21天取面神經(jīng)核層面腦干冠狀切片，Tunel凋亡染色比較雙側(cè)面神經(jīng)核內(nèi)面運動神經(jīng)元的凋亡指數(shù)。
　　結(jié)果：P(passage)3、P4SDBMSCs均一性強，體外增

4、殖能力與傳代能力強;SDBMSCs能自主分泌高水平IL-6、HGF、PGE2、iNOS與TGF-β1五種細(xì)胞因子;術(shù)后第9天，未切斷FN組、切斷FN組中注射SDBMSCs側(cè)SDBMSCs(+)的頸部引流淋巴結(jié)Th17亞群比例均低于未注射SDBMSCs側(cè)SDBMSCs（-）的頸部引流淋巴結(jié)Th17亞群比例;雙側(cè)切斷面神經(jīng)干的SD大鼠雙側(cè)面神經(jīng)核在術(shù)后21天均可見明顯的面運動神經(jīng)元(FMN，facial motoneuron)凋亡現(xiàn)象，右側(cè)