BMSCs-GFP移植治療小鼠創(chuàng)傷性腦損傷的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:
  顱腦損傷是當今社會近次于心腦血管疾病、腫瘤嚴重危害人民健康的第三大疾病,因其高死亡率及高致殘率,多年來受到人們的高度重視。近十年來,隨著手術方法及手術理念念的進步,以及各種先進有效的治療手段在臨床中應用,重型顱腦損傷死亡率有了明顯下降,但致殘率卻明顯升高。大部分腦外傷患者遺留下不同程度的神經功能障礙,例如認知及精神障礙、失語、偏癱,甚至長期植物狀態(tài)生存等。顱腦損傷所導致的神經功能障礙已經成為腦損傷治療過程中所面臨的重大

2、難題,因為傳統(tǒng)的治療方無法促進神經元再生、修復受損的神經元細胞。因此尋求一種安全有效的途徑修復由于創(chuàng)傷性腦損傷導致的腦組織結構和功能上的損傷已經成為當前神經外科面臨的一項重要研究課題。近年來干細胞的發(fā)現,給人們帶來了希望和信心,大量研究表明干細胞移植是唯一種修復和替代壞死腦細胞的方法,可明顯改善損傷后腦細胞功能,顯示出美好的應用前景。骨髓間充質干細胞(Bone Mesenchymal-Stem Cells, BMSCs)具有其獨特的優(yōu)點

3、:1.來源廣泛;2.自體、異體易獲得性;3.體外可擴增性及多向分化潛能;4.遺傳穩(wěn)定;5.低免疫原性。因此成為現細胞領域研究的焦點。但干細胞因其眾多不確定因素,對腦外傷治療仍初于動物實驗階段。本研究通過建立小鼠創(chuàng)傷性顱腦損傷模型,經球后靜脈移植GFP標記的BMSC,觀察BMSC在創(chuàng)傷灶周圍的遷移及定植,以探討間充質干細胞治療顱腦損傷的有效性及安全性。
  目的:
  探討經球后靜脈叢移植骨髓間充質干細胞(BMSCs)對治療創(chuàng)

4、傷性腦損傷小鼠有效性和安全性,并探討其可能的機制。
  方法:
  采用改良Feeney法(自由落體打擊法)構建創(chuàng)傷性腦損傷小鼠模型,90只小鼠隨機分為3組:對照組、模型組及BMSCs組。BMSCs組于造模成功后1h經球后靜脈叢注射GFP標記的BMSC,模型組則注射等量生理鹽水,對照組只行及縫合術。觀察各組以下指標:1,觀察傷后第6h、12h、24h、3d及7d等不同時間點行神經損傷嚴重程度(NSS)評分;2,通過腦組織切片

5、TTC(2,3,5-氯化三苯四唑)染色計算傷后3d及7d腦挫傷面積;3,傷后2h、6h、24h及3d利用共聚焦熒光顯微鏡觀察腦損后BMSCs-GFP在創(chuàng)傷區(qū)的遷移及定植情;4,傷后3d及14d檢測各組創(chuàng)傷區(qū)神經元特異性烯醇化酶(NSE)及膠質纖維酸性蛋白(GFAP)。
  結果:
  采用自由落體打擊法成功構建顱腦損傷小鼠模型,傷后均出現明顯的神經功能障礙。BMSCs組自第3d腦挫傷面積較模型組明顯減小,傷后7d NSS評分

6、明顯下降,與模型組相比差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。BMSCs-GFP移植后在腦挫傷內及周圍可見綠色熒光分布,隨著時間的推移,綠色熒光分布量逐漸增加,提示間充質干細胞移植后逐漸向損傷灶及周圍遷移定植。免疫組織化學結果檢測顯示,傷后3d及14d BMSCs組小鼠腦組織損傷區(qū)NSE、GFAP陽性細胞數量均較對照組、模型組明顯增多,傷后14d差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  結論:
  BMSC移植入創(chuàng)傷性顱腦損傷

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