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文檔簡介
1、目的:
研究成熟卵泡與未成熟卵泡中促卵泡刺激素受體(FSHR)及干細胞因子(SCF)的表達情況,探究顆粒細胞中FSHR及SCF的表達與卵泡成熟是否有關;研究不同濃度的重組促卵泡刺激素(rFSH)對體外培養(yǎng)的人卵巢顆粒細胞的SCF信使RNA(mRNA)及蛋白表達是否有影響;探討人卵巢顆粒細胞中促卵泡刺激素調節(jié)干細胞因子分泌的機制。
方法:
實驗性研究。收集行卵胞漿內單精子顯微注射技術(ICSI)患者(均為輸卵
2、管因素或男方因素)的顆粒細胞,以成熟卵泡及未成熟卵泡來源分組,分別檢測兩組顆粒細胞中FSHR及SCF的表達情況;對行體外受精-胚胎移植技術(IVF-ET)后的卵泡液來源的顆粒細胞進行不同濃度的rFSH(果納芬;10IU/L,25 IU/L,50 IU/L,100 IU/L,200IU/L)干預培養(yǎng),與空白對照組(正常培養(yǎng))一同檢測FSHR及SCF的表達情況;用含有rFSH、環(huán)磷酸腺苷激動劑(cAMP)及PKA抑制劑(H-89)的培養(yǎng)基培
3、養(yǎng)IVF卵泡液來源的顆粒細胞,將細胞分為6組:空白對照組,rFSH單獨培養(yǎng)組,H-89單獨培養(yǎng)組,cAMP單獨培養(yǎng)組,H-89聯(lián)合cAMP培養(yǎng)組,H-89聯(lián)合rFSH培養(yǎng)組。用Real-time PCR,細胞免疫熒光技術及Western blot檢測人顆粒細胞中FSHR及SCF的蛋白和mRNA水平。
結果:
未成熟卵泡來源的顆粒細胞中的FSHR及SCF的表達比成熟卵泡來源顆粒細胞中較低;用不同劑量的rFSH干預培養(yǎng)顆
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