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文檔簡介
1、目的: 生殖支原體可以引起尿道炎、宮頸炎,與慢性非細菌性前列腺炎、不孕不育癥有一定的相關性,是一種正在危害人類健康的病原菌。生殖支原體通常采用SP4培養(yǎng)基培養(yǎng)或PCR方法進行檢測,由于生殖支原體生長緩慢,用SP4培養(yǎng)基培養(yǎng)一般需要1—3個月才能出結果,嚴重貽誤臨床診治;PCR法作為分子生物學的一次重大革命性技術,在生殖支原體的實驗室診斷方面得到了充分應用,但PCR技術要求高,需要相應設備及場地,一般醫(yī)院難以滿足,這就大大限制了生殖支原體
2、檢測在臨床的廣泛開展,當前臨床急需一種能夠方便、快捷的生殖支原體檢測試劑盒。本課題借助傳統(tǒng)的SP4培養(yǎng)液為基礎,參考文獻并結合多年支原體研究經(jīng)驗,開發(fā)出一種可以快速培養(yǎng)生殖支原體的培養(yǎng)液,從而可以及時輔助臨床進行生殖支原體的檢測。
方法: 借助傳統(tǒng)SP4培養(yǎng)液配方,對其各組分進行優(yōu)化試驗,在此基礎上設計靈敏度優(yōu)化方案和特異性優(yōu)化方案,結合正交實驗,篩選出生殖支原體培養(yǎng)試劑的最佳配方;然后用臨床分離的生殖支原體菌株和特異性標準菌
3、株進行靈敏度與特異性的初步驗證;最后,以熒光定量PCR試劑盒為對照,利用優(yōu)化后的培養(yǎng)液對872例臨床生殖支原體感染疑似患者標本進行檢測分析,評價該培養(yǎng)液的性能。
結果: 通過動物血清、蛋白胨、酵母粉等組分的正交設計,優(yōu)化了傳統(tǒng)SP4培養(yǎng)液,再通過添加調整無機鹽、維生素、氨基酸等生長因子,使培養(yǎng)液靈敏度達到最佳;通過添加多種抑菌劑,從而可以有效抑制非生殖支原體微生物,保持培養(yǎng)液的特異性;利用臨床分離的生殖支原體菌株對其進行評價,
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