生殖支原體培養(yǎng)液的研制及臨床應用.pdf

1、目的: 生殖支原體可以引起尿道炎、宮頸炎，與慢性非細菌性前列腺炎、不孕不育癥有一定的相關性，是一種正在危害人類健康的病原菌。生殖支原體通常采用SP4培養(yǎng)基培養(yǎng)或PCR方法進行檢測，由于生殖支原體生長緩慢，用SP4培養(yǎng)基培養(yǎng)一般需要1—3個月才能出結果，嚴重貽誤臨床診治；PCR法作為分子生物學的一次重大革命性技術，在生殖支原體的實驗室診斷方面得到了充分應用，但PCR技術要求高，需要相應設備及場地，一般醫(yī)院難以滿足，這就大大限制了生殖支原體

2、檢測在臨床的廣泛開展，當前臨床急需一種能夠方便、快捷的生殖支原體檢測試劑盒。本課題借助傳統(tǒng)的SP4培養(yǎng)液為基礎，參考文獻并結合多年支原體研究經(jīng)驗，開發(fā)出一種可以快速培養(yǎng)生殖支原體的培養(yǎng)液，從而可以及時輔助臨床進行生殖支原體的檢測。
　　方法: 借助傳統(tǒng)SP4培養(yǎng)液配方，對其各組分進行優(yōu)化試驗，在此基礎上設計靈敏度優(yōu)化方案和特異性優(yōu)化方案，結合正交實驗，篩選出生殖支原體培養(yǎng)試劑的最佳配方；然后用臨床分離的生殖支原體菌株和特異性標準菌

3、株進行靈敏度與特異性的初步驗證；最后，以熒光定量PCR試劑盒為對照，利用優(yōu)化后的培養(yǎng)液對872例臨床生殖支原體感染疑似患者標本進行檢測分析，評價該培養(yǎng)液的性能。
　　結果: 通過動物血清、蛋白胨、酵母粉等組分的正交設計，優(yōu)化了傳統(tǒng)SP4培養(yǎng)液，再通過添加調整無機鹽、維生素、氨基酸等生長因子，使培養(yǎng)液靈敏度達到最佳；通過添加多種抑菌劑，從而可以有效抑制非生殖支原體微生物，保持培養(yǎng)液的特異性；利用臨床分離的生殖支原體菌株對其進行評價，