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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
1、對(duì)比觀察深I(lǐng)I度燙傷大鼠早期創(chuàng)面外觀、組織病理、創(chuàng)面愈合百分比以及血栓素B2、微血管密度水平的變化,了解燙傷大鼠深I(lǐng)I度創(chuàng)面早期微循環(huán)的變化規(guī)律。
2、觀察前列地爾早期干預(yù)后深I(lǐng)I度燙傷大鼠創(chuàng)面外觀、組織病理、創(chuàng)面愈合百分比以及血栓素B2、微血管密度水平的變化,了解前列地爾早期干預(yù)對(duì)大鼠深I(lǐng)I度燙傷創(chuàng)面微循環(huán)的影響,為改善深I(lǐng)I度燒(燙)傷創(chuàng)面的轉(zhuǎn)歸、促進(jìn)愈合,提高燙傷創(chuàng)面的臨床治療效果提供新思路。
2、> 方法:
湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司成年無(wú)特定病原體( SPF)級(jí)(SD) Sprague-Dawley大鼠90只,雌雄各半,重量為(200±20)g。隨機(jī)分為3組:假傷組(n=30)、燙傷組(n=30)、燙傷+前列地爾干預(yù)組(n=30)。參與實(shí)驗(yàn)的大鼠均予以適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,各組分別予以硫化鈉脫毛,以及水合氯醛進(jìn)行麻醉。燙傷+前列地爾干預(yù)組及燙傷組大鼠給予蒸汽壓力為4 Mpa的106℃蒸汽燙傷5秒,使其背部脫毛部位造
3、成30%TBSA深I(lǐng)I°燙傷,燙傷后進(jìn)行補(bǔ)液抗休克治療。假傷組大鼠用37℃水霧噴灑背部脫毛區(qū)5秒。大鼠創(chuàng)面給予碘伏進(jìn)行消毒處理,2/日。燙傷后假傷組、燙傷組用0.9%生理鹽水1ml進(jìn)行腹腔注射,燙傷+前列地爾干預(yù)組1.6μg/kg前列地爾加生理鹽水配成1ml溶液進(jìn)行腹腔注射。之后每日對(duì)假傷組、燙傷組予以0.9%生理鹽水1ml腹腔注射,燙傷+前列地爾干預(yù)組予以1.6μg/kg前列地爾加0.9%生理鹽水配成1ml溶液腹腔注射,直至大鼠處死。
4、觀察記錄各組大鼠創(chuàng)面外觀,并于第3、7、14天各取10只計(jì)算傷后愈合百分比,以及在麻醉后無(wú)菌條件下腹主動(dòng)脈取血5ml,選用無(wú)菌促凝管裝取血的樣本,室溫靜置30分鐘,然后放置在離心機(jī),以4000r/min,離心5分鐘,離心結(jié)束后收集血清,ELISA法檢測(cè)大鼠血清TXB2。同時(shí)用生理鹽水對(duì)大鼠進(jìn)行心臟快速灌注,直至肺組織蒼白,將大鼠背部創(chuàng)面組織剪下,放置在甲醛中浸泡,用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)創(chuàng)面微血管中CD31的表達(dá),從而計(jì)算出微血管的密度
5、,以及用HE染色法觀察各時(shí)相點(diǎn)創(chuàng)面的病理形態(tài)學(xué)變化。
結(jié)果:
1、各組大鼠創(chuàng)面外觀
假傷組背部為正常皮膚,無(wú)明顯變化。傷后第3天:燙傷+前列地爾干預(yù)組創(chuàng)面少許出現(xiàn)黑色點(diǎn)狀物,未見(jiàn)滲出,燙傷組可見(jiàn)大部分創(chuàng)面發(fā)黑,且部分形成焦痂,少許見(jiàn)滲出。傷后第7天:燙傷+前列地爾干預(yù)組部分形成干痂,創(chuàng)面較前縮小,燙傷組創(chuàng)面仍見(jiàn)少許滲出,創(chuàng)面焦痂,稍縮小,發(fā)黑。傷后第14天:燙傷+前列地爾干預(yù)組創(chuàng)面明顯縮小,干燥,無(wú)滲出,燙
6、傷組創(chuàng)面發(fā)黑,焦痂少許減小,但仍大片黑色壞死缺損,且融合成片,壞死創(chuàng)面周?chē)猩倭磕撔苑置谖铩?br> 2、各組大鼠創(chuàng)面組織病理形態(tài)學(xué)
假傷組病理形態(tài)未見(jiàn)明顯異常。傷后第3天:燙傷+前列地爾干預(yù)組,可見(jiàn)少許新生上皮生長(zhǎng),有炎細(xì)胞浸潤(rùn),燙傷組見(jiàn)創(chuàng)面有大量壞死組織以及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。第7天:燙傷+前列地爾干預(yù)組上皮組織增厚明顯,燙傷組新生上皮出現(xiàn),薄,且不明顯。第14天:燙傷+前列地爾干預(yù)組新生上皮成熟,且見(jiàn)創(chuàng)面大部分基本愈合,燙傷
7、組見(jiàn)較薄的新生上皮組織,未見(jiàn)有表皮形成。
3、各組大鼠創(chuàng)面愈合百分比
傷后第3天:燙傷+前列地爾干預(yù)組與燙傷組創(chuàng)面愈合百分比無(wú)明顯差異。第7、14天:燙傷+前列地爾干預(yù)組的創(chuàng)面愈合百分比均顯著高于燙傷組(P<0.05),假傷組無(wú)創(chuàng)面變化。
4、各組大鼠血清TXB2水平
?。?)燙傷+前列地爾干預(yù)組血清TXB2水平隨時(shí)間呈下降趨勢(shì),燙傷組血清TXB2水平隨時(shí)間呈上升趨勢(shì)。
?。?)與假傷組比較
8、:燙傷+前列地爾干預(yù)組和燙傷組在各時(shí)相點(diǎn)均高于假傷組(P<0.05)。燙傷+前列地爾干預(yù)組在第14天時(shí)與假傷組較為接近,燙傷組仍明顯高于假傷組。
(3)與燙傷組比較:燙傷+前列地爾干預(yù)組傷后第3、7、14天血清TXB2水平均低于燙傷組(P<0.05)。
5、各組大鼠創(chuàng)面MVD:
假傷組未見(jiàn)新生血管形成,燙傷+前列地爾干預(yù)組、燙傷組,創(chuàng)面MVD隨時(shí)間推移表現(xiàn)出上升趨勢(shì),但傷后第3、7、14天三個(gè)時(shí)相點(diǎn),燙傷+
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