

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、四氯苯醌(TCBQ)是工業(yè)除草劑五氯酚的代謝產(chǎn)物,其體內(nèi)外模型已顯示出活性氧機制誘導(dǎo)的肝毒性和遺傳毒性作用。Nrf2/ARE信號通路在機體內(nèi)的抗氧化過程中發(fā)揮重要作用,它可以有效誘導(dǎo)Ⅱ相解毒酶及抗氧化蛋白的表達(dá)。Keap1和Bach1均是機體內(nèi)Nrf2/ARE信號通路的重要轉(zhuǎn)錄抑制因子,在Nrf2通路的激活中發(fā)揮重要作用。該研究的目的是為了分析TCBQ能否激活Nrf2/ARE信號通路,并探討其具體的激活機制,可以為TCBQ誘導(dǎo)毒性干預(yù)的
2、治療提供依據(jù)。
第一部分:Nrf2/ARE信號通路的激活需要Nrf2和Keap1的解離,該部分的研究分析了TCBQ能否激活Nrf2信號通路,并分析了Keap1在Nrf2信號通路激活中的重要作用。HepG2細(xì)胞在使用TCBQ給藥后,發(fā)現(xiàn)Nrf2及抗氧化蛋白HO-1、NQO1的表達(dá)上調(diào),并存時間和劑量依賴關(guān)系。免疫熒光實驗同樣證明了 TC BQ作用后Nrf2表達(dá)的上調(diào)。qRT-PCR實驗顯示了Nrf2而非Keap1基因表達(dá)水平的上
3、調(diào)。Western Blot分別檢測細(xì)胞核、質(zhì)蛋白內(nèi)Nrf2的變化,清晰證明了Nrf2由細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移進(jìn)入細(xì)胞核的過程。雙熒光素酶實驗顯示了Nrf2入核后,和ARE信號元件結(jié)合,并誘導(dǎo)抗氧化蛋白的表達(dá),這可能作為 TCBQ中毒后的抗氧化效應(yīng)。Keap1依賴的Nrf2通路激活機制是目前研究的重點。氧化還原型電泳結(jié)果顯示TCBQ促使了Keap1交聯(lián)二聚體的形成,免疫共沉淀實驗顯示它并沒有誘導(dǎo)Keap1和Cullin3的解離,泛素化實驗顯示TCB
4、Q誘導(dǎo)了泛素分子由Nrf2向Keap1的轉(zhuǎn)移。Keap1交聯(lián)二聚體的形成及泛素分子的轉(zhuǎn)移均會引起其構(gòu)象的改變,促使Nrf2從Keap1上釋放并入核,進(jìn)而激活Nrf2/ARE信號通路。
第二部分:和Keap1類似,Bach1是Nrf2的另一重要轉(zhuǎn)錄抑制因子,可以與Nrf2競爭同ARE抗氧化元件結(jié)合,進(jìn)而調(diào)控抗氧化蛋白的表達(dá)。該部分研究的主要目的是探討B(tài)ach1在TCBQ誘導(dǎo)Nrf2/ARE信號通路激活中的作用。Western B
5、lot和免疫熒光實驗清晰證明了TCBQ給藥后,Bach1在1h內(nèi)即完成了出核的過程,并伴隨著Nrf2的逐漸入核。免疫共沉淀實驗證明了TCBQ誘導(dǎo)Bach1的出核依賴于Bach1和Crm1受體結(jié)合以及酪氨酸磷酸化作用。ChIP實驗證明了TCBQ作用于細(xì)胞后,Nrf2和Bach1競爭性的與ARE結(jié)合。泛素化實驗顯示了Bach1出核后,在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)經(jīng)泛素化作用而降解。qRT-PCR實驗證明了TCBQ增加了Bach1的轉(zhuǎn)錄水平,通過加入放線菌酮(
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- Nrf2-ARE通路對肝癌HepG2細(xì)胞周期及其細(xì)胞自噬的影響.pdf
- 激活Nrf2-ARE信號通路對aGVHD的影響及機制研究.pdf
- 四氯苯醌誘導(dǎo)PC12細(xì)胞神經(jīng)毒性的炎性有關(guān)信號通路分析.pdf
- PMID激活Nrf2-ARE信號通路的機制及其抗氧化作用研究.pdf
- 丙酸睪酮激活Nrf2-ARE信號通路改善老年大鼠腎臟功能.pdf
- CdTe誘導(dǎo)凋亡機制及Nrf2-ARE信號通路的研究.pdf
- 缺氧后處理、藥物后處理激活Nrf2-ARE通路機制的研究.pdf
- 四氯苯醌調(diào)控MDA-MB-231細(xì)胞DNA損傷修復(fù)的機制分析.pdf
- 己酮可可堿通過激活Nrf2-ARE信號通路改善老年大鼠肝臟功能.pdf
- 丹酚酸A調(diào)控Nrf2通路對HepG2細(xì)胞氧化損傷保護(hù)機制的研究.pdf
- EGCG激活Nrf2-ARE通路對液壓沖擊腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用及其機制.pdf
- 多氯聯(lián)苯醌誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡的線粒體依賴信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑研究.pdf
- α-硫辛酸再生谷胱甘肽的機制及Nrf2-ARE信號通路的作用研究.pdf
- Nrf2-ARE通路在心肌缺血后處理、藥物后處理中激活機制的研究.pdf
- 角膜基質(zhì)細(xì)胞Nrf2-ARE信號通路活化缺陷在圓錐角膜發(fā)病中的作用.pdf
- 氟對大鼠成骨細(xì)胞Nrf2-ARE信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用研究.pdf
- Nrf2-ARE信號通路與2型糖尿病心肌病發(fā)病機制的相關(guān)研究.pdf
- Nrf2-ARE信號通路在ALS轉(zhuǎn)基因小鼠模型中的研究.pdf
- 大鼠腦出血后Nrf2-ARE信號通路對灶周神經(jīng)保護(hù)作用及內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞激活的機制研究.pdf
- Leptin對HepG2細(xì)胞中BSEP蛋白表達(dá)及信號通路的影響.pdf
評論
0/150
提交評論