MALAT1 mRNA在原發(fā)性肝癌組織中的表達及其臨床意義.pdf

1、背景:肝細胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）作為肝原發(fā)性惡性腫瘤，具有發(fā)病率及病死率高，預后差的特點。多數(shù)早期HCC患者通過手術可以獲益，但術后復發(fā)是嚴重制約HCC患者遠期療效的瓶頸。所以尋找一個有效預測患者復發(fā)轉移風險的生物學指標極為重要。MALAT1（Metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript1），也稱肺腺癌轉移相關轉錄本1，作為1ncRNA

2、s其中一員，廣泛表達于多種正常組織，并具有組織特異性。然而MALAT1在多種惡性腫瘤組織及血漿中也被發(fā)現(xiàn)異常表達，其表達水平與腫瘤形成、發(fā)展、遠處轉移及預后密切相關。但有關MALAT1在肝癌組織中的研究，尤其與臨床病理特征及患者預后的報道較少。
　　目的:探討MALAT1在原發(fā)性肝細胞癌組織的表達情況以及MALAT1的表達水平與HCC患者臨床病理特征之間的關系，分析MALAT1的表達與HCC患者根治術后不同復發(fā)時間的相關性，為尋找

3、可用于評估肝癌患者預后的生物學標志物提供臨床依據(jù)。
　　方法:采用Trizol法提取組織中的總RNA，并對RNA進行反轉錄。通過采用qRT-PCR方法檢測73例原發(fā)性肝細胞癌患者根治術切除的癌組織以及21例HCC癌旁組織中MALAT1 mRNA的表達水平，以GAPDH為內(nèi)參照，將MALAT1的mRNA實際表達量與GAPDHmRNA實際表達量比較，獲得MALAT1的相對表達量數(shù)值。MALAT1 mRNA的表達水平與HCC臨床病理特征

4、之間的關系應用Mann-Whitne檢驗進行分析;P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。利用單因素分析MALAT1 mRNA的表達水平與HCC根治術后患者不同復發(fā)時間的關系。
　　結果:
　　1.MALAT1擴增曲線與溶解曲線
　　MALAT1擴增曲線可見曲線呈“S”型，光滑，有明顯擴增期和平臺期。MALAT1溶解曲線呈單峰，未見雜峰，提示MALAT1純度良好，溶解溫度為80.96℃。
　　2、實時熒光定量PCR測定結

5、果
　　在所有HCC癌及癌旁組織標本中，MALAT1均呈不同程度表達。在73例HCC癌組織中，MALAT1mRNA的表達水平顯著低于癌旁組織中的表達水平，中位值3.15(1.46，6.63) VS17.45(8.77，22.15)，組間差異具有統(tǒng)計學意義(Z=2.547，P＜0.001)。
　　3、HCC組織中，MALAT1mRNA表達水平與臨床病理特征的關系
　　MALAT1mRNA表達水平與HCC腫塊大小、術前AF

6、P以及合并肝硬化有關。腫瘤最大直徑＞5cm組MALAT1mRNA相對表達量顯著高于直徑≤5cm組的表達，兩者之間的差異具有統(tǒng)計學意義（Z=-2.611，P=0.009）。MALAT1mRNA表達水平在術前AFP的不同表達量間具有顯著性差異(Z=6.201，P=0.045)。其中，AFP＞400μ g/L的HCC組MALAT1mRNA的表達顯著高于40＜AFP≤400μg/L組，40＜AFP≤400μg/L組MALAT1mRNA的表達顯著

7、高于AFP≤40μg/L，提示隨著術前AFP表達量的增加，MALAT1的表達水平增高。在合并肝硬化HCC組織中，MALAT1 mRNA的表達水平為3.91(1.9443，9.6541)，顯著高于無合并肝硬化HCC的表達水平2.08(1.2854，3.3997)，兩組之間的差異具有統(tǒng)計學意義（Z=-2.351，P=0.019）。
　　MALAT1表達水平在不同年齡、性別、民族、煙酒史、家族史、肝炎病史，以及不同水平的ALT、AST、

8、TB、腫塊數(shù)目、有無包膜、血管侵犯、組織學分級、TNM分期、BCLC分期等臨床病理特征之間的差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　4、MALAT1mRNA的表達與HCC術后不同復發(fā)時間的關系
　　73例HCC患者中，出現(xiàn)術后復發(fā)44例，未出現(xiàn)復發(fā)29例。根治術后的HCC患者中，MALAT1mRNA表達水平的差異在不同復發(fā)時間段具有統(tǒng)計學意義(Z=9.437，P=0.028)。其中，根治術后6個月內(nèi)復發(fā)的患者MALAT1m

9、RNA表達水平最低，根治術后12～18m出現(xiàn)復發(fā)的患者其MALAT1mRNA表達水平最高，提示MALAT1mRNA的表達水平與HCC根治術后復發(fā)時間有關，但MALAT1在原發(fā)性肝癌術后復發(fā)轉移機制中所起的作用值得進一步研究。
　　結論:
　　1.MALAT1在癌旁組織中的表達顯著高于癌組織。
　　2.MALAT1的表達水平在術前APF＞400μg/L組顯著增高。
　　3.在腫瘤大?。?cm組MALAT1的表達水平