LL-37抑制結(jié)核分枝桿菌感染巨噬細(xì)胞炎性因子的分泌研究.pdf

1、目的:
　　探究LL-37在感染結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）的巨噬細(xì)胞(macrophage,Mφ)中對(duì)炎性因子分泌的影響及其抗炎作用。
　　方法：
　?。?）使用豆蔻酰佛波醇乙酯（PMA）將THP-1細(xì)胞誘導(dǎo)分化為具有吞噬能力的巨噬細(xì)胞（Mφ），用Mtb感染Mφ，建立細(xì)胞模型，用不同濃度的LL-37處理感染Mtb的巨噬細(xì)胞，并設(shè)置對(duì)照組。
　　（2）實(shí)驗(yàn)分組：①正

2、常對(duì)照組: THP-1+normal saline(NS);② Mtb組:THP-1+Mtb;③ Mtb+5μg/ml LL-37組: THP-1+Mtb+5μg/ml LL-37;④Mtb+10μg/ml LL-37組: THP-1+Mtb+10μg/ml LL-37;⑤ Mtb+20μg/ml LL-37組: THP-1+Mtb+20μg/ml LL-37。
　?。?）不同時(shí)間點(diǎn)收獲細(xì)胞，提取RNA，用(Real-time P

3、CR,RT-PCR)法檢測(cè)促炎因子IL-12p40、TNF-α及抗炎因子IL-4、IL-10 mRNA的表達(dá)；用ELISA法測(cè)定以上各組細(xì)胞培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子IL-12p40、TNF-α、IL-4、IL-10的分泌量。
　　結(jié)果：
　　與正常對(duì)照組相比，Mtb感染組各時(shí)間段IL-12p40、TNF-α、IL-4及IL-10的mRNA表達(dá)上調(diào)，并且其分泌量顯著增加（P＜0.05）；LL-37刺激組與Mtb組相比，各時(shí)間段外源性