黃芪甲苷對胃癌SGC7901-DDP細胞多藥耐藥性的逆轉作用及其機制研究.pdf

1、研究目的:
　　初步探考黃芪甲苷逆轉人胃癌耐藥細胞株SGC7901/DDP多藥耐藥性的作用以及其可能機制。
　　研究方法:
　　1.MTT法鑒定SGC7901/DDP細胞對順鉑的耐藥性;
　　2.MTT法測定黃芪甲苷和維拉帕米的細胞毒性，選取兩種藥物的無毒濃度進行下一步的實驗。
　　3.以逆轉劑維拉帕米作為陽性對照，MTT法測定無毒濃度的黃芪甲苷逆轉SGC7901/DDP細胞多藥耐藥性的作用;
　　4

2、.RT-PCR法檢測黃芪甲苷對MDR1基因表達的影響;
　　5.Western bolt法觀察黃芪甲苷對MDR1基因編碼產(chǎn)物P-gp表達的影響，推測黃芪甲苷逆轉耐藥的可能機制。
　　研究結果:
　　1.SGC7901/DDP細胞對順鉑的敏感性明顯弱于SGC7901細胞，相對耐藥指數(shù)為3.26，說明該細胞具有耐藥性。
　　2.黃芪甲苷能抑制SGC7901/DDP耐藥細胞的增殖，并呈時效及量效關系，維拉帕米對耐藥細胞

3、有強大的增殖抑制作用，且累積毒性明顯。0.02、0.04、0.08mg/mL黃芪甲苷及10μg/mL維拉帕米對SGC7901/DDP細胞的抑制率均不超過10％，可作為無毒濃度。
　　3.黃芪甲苷能增加SGC7901/DDP細胞對順鉑的敏感性而實現(xiàn)多藥耐藥性的逆轉，并有濃度依賴性，0.02、0.04、0.08mg/mL黃芪甲苷作用24h后，細胞抑制率分別為11.07±1.09、16.29±1.32和24.63±1.68，均高于對照組

4、的8.97±1.07，相對逆轉倍數(shù)依次為1.23、1.82和2.75，10μg/mL維拉帕米的相對逆轉指數(shù)為4.67。
　　4.RT-PCR結果顯示經(jīng)不同濃度的黃芪甲苷處理后的SGC7901/DDP細胞MDR1mRNA水平均有所下降。
　　5.Western bolt結果顯示隨著黃芪甲苷濃度增加，P-gp相對表達量逐漸下降，0.08mg/ml黃芪甲苷能明顯下調(diào)P-gp的表達水平。
　　研究結論:
　　本實驗證明了