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文檔簡介
1、目的:探索添加RANKL對磷酸鈣骨水泥/聚乳酸-羥基乙酸微球復合物在體內降解成骨的影響。
方法:采用雙乳化法制備PLGA微球,按0.2gPLGA微球/5μgRANKL的比例進行混合后孵育30分鐘,然后冷凍干燥24小時,獲得表面吸附有RANKL的PLGA微球,再按質量比為CPC∶PLGA=4∶1加入CPC中,混勻。選用18只成年健康的SD雄性大鼠(平均體重約310g),制備后肢股骨髁突缺損模型,按照植入材料不同隨機分為3組。A:
2、實驗組(CPC/PLGA+RANKL)、B:陰性對照組(CPC/PLGA)、C:空白組(不植入任何材料);A組為將添加有RANKL的CPC/PLGA微球復合物(CPC/PLGA+RANKL)植入股骨髁突缺損中;B組為將CPC/PLGA微球復合物植入股骨髁突缺損中;C組為制備股骨髁突缺損后不植入任何材料;3組動物觀察4周、8周、12周后處死,切取股骨髁突標本。對樣本進行組織學觀察分析,分析CPC/PLGA+RANKL復合物在體內的降解及骨
3、組織反應。用Image pro plus6.0專業(yè)圖像分析軟件測量各組骨缺損區(qū)的新生骨組織面積比例,再用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。
結果:SD大鼠術后恢復良好,術區(qū)未見明顯紅腫、化膿等感染癥狀,進食規(guī)律,活動正常,未觀察到毒性反應及其它異常反應。
組織學檢查:(1)術后4周時,CPC/PLGA+RANKL組可觀察到缺損邊緣處的CPC出現(xiàn)明顯的降解吸收,被新生骨組織替代,條索狀的新生骨組織相互交織成網狀,
4、并向缺損中心長入;CPC/PLGA組可觀察到缺損邊緣處有少量的CPC發(fā)生降解,新生骨組織生成的量較少,且僅位于邊緣處;空白組缺損范圍內僅有少量條索狀或島狀的新生骨組織散在分布。(2)術后8周時,CPC/PLGA+RANKL組PLGA微球出現(xiàn)降解,CPC的降解較4周時更明顯,且材料內部的CPC也出現(xiàn)了降解,被新生骨組織替代,使得原始的邊界難以辨認;CPC/PLGA組的PLGA微球也發(fā)生了降解,新生骨組織向缺損內生長,新生骨組織的量比4周時
5、明顯增多;空白組新骨組織生成的量增多,呈條索狀或小片狀。(3)術后12周時,CPC/PLGA+RANKL組植入材料大部分已經降解,材料內部只有少量CPC殘留以及邊緣處散在的未被降解的CPC基質,新生骨組織交織呈網狀結構;與CPC/PLGA+RANKL組相似,CPC/PLGA組材料內部只有少部分CPC殘留,邊緣處仍有散在的CPC未被降解,植入材料的結構較為疏松,已經失去原有的完整性;空白組新生骨組織較8周時增多,向缺損中心生長,缺損未能完
6、全愈合。
新生骨面積比例分析:(1)術后4周時,新生骨面積比例的比較為CPC/PLGA+RANKL組(9.66±3.84)%>空白組(5.76±1.58)%>CPC/PLGA組(4.01±3.51)%,CPC/PLGA+RANKL組和CPC/PLGA組之間的差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),CPC/PLGA+RANKL組和空白組之間的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),CPC/PLGA組和空白組之間的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.
7、05);(2)術后8周時,新生骨面積比例的比較為CPC/PLGA+RANKL組(25.01±7.32)%>CPC/PLGA組(23.37±4.13)%>空白組(6.11±5.37)%,CPC/PLGA+RANKL組和CPC/PLGA組之間的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),CPC/PLGA+RANKL組與空白組之間的差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),CPC/PLGA組與空白組之間的差異也具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);(3)術后12周
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