自噬通路在急性胰腺炎后期恢復中的作用及其相關調(diào)控機制研究.pdf

1、目的：自噬被認為是把雙刃劍，在不同的情況下，自噬既可導致細胞損傷，也有細胞保護作用。目前，自噬在急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）早期的致病作用已得到肯定。而多數(shù)情況下AP為自限性，病程后期可自愈。自噬是否是AP“自愈”現(xiàn)象背后的保護機制？本研究擬建立自限性AP模型，重點觀察自噬通路的功能狀態(tài)在AP后期恢復階段的變化，探討其變化的意義，并探索其可能的調(diào)控機制。
　　方法：采用SD大鼠胰膽管內(nèi)逆行注射3％牛磺膽

2、酸鈉（0.1ml/100g）建立自限性AP動物模型。通過血清淀粉酶檢測、組織病理評分以及細胞死亡分析（TUNEL法）評估AP病程變化。同時，通過Western-blot和免疫組化方法檢測自噬通路相關蛋白LC3-II、p62和Lamp-2的表達時程以評估自噬通路功能的變化；檢測磷酸化S6RP蛋白的表達以反映mTOR信號通路活性的變化。最后，以雷帕霉素干預阻斷mTOR信號活性，觀察雷帕霉素干預后上述指標的改變。
　　結果:1.AP模型

3、建立后，血清淀粉酶水平在6小時（h）開始升高，12h達最高點，在24h雖有降低，但仍維持在高水平，36h和48h組的血淀粉酶則明顯下降；胰腺組織病理評分及腺泡細胞壞死程度皆在6-24h逐漸加重，36-48h明顯緩解。
　　2. Lamp-2表達自造模后6h開始減少，12-24h幾近缺失，此后（36-48h）其表達明顯恢復；LC3-II和p62表達自造模后6-24h逐步增加，36-48h則明顯減少；P-S6RP表達于造模后6h輕度升

4、高，12-24h出現(xiàn)表達缺失，36-48h表達明顯上調(diào)。
　　3.與溶劑對照組對比，雷帕霉素干預后，胰腺組織在造模后36h和48h的mTOR信號活性被抑制；同時，胰腺組織病理損傷及腺泡細胞壞死程度顯著加重，Lamp-2的表達明顯減少，LC3-II及p62表達水平上調(diào)。
　　結論：1.通過3%?；悄懰徕c胰膽管逆行注射方法建立的大鼠AP模型，其胰腺損傷于前期加重，后期緩解，呈自愈特點。
　　2.本模型中，自噬通路功能的改善