大鼠實(shí)驗(yàn)性矽肺中樹突狀細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子分布規(guī)律.pdf

1、背景和目的:
　　矽肺危害嚴(yán)重，然而機(jī)制仍不完全清楚，但已知其發(fā)生發(fā)展過程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一是免疫反應(yīng)。樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）是已知功能最強(qiáng)的抗原呈遞細(xì)胞，且與巨噬細(xì)胞有相近、交叉的結(jié)構(gòu)與功能，推測(cè) DC在矽塵識(shí)別與攝取、矽肺獲得性免疫應(yīng)答中很可能也是極其重要的效應(yīng)細(xì)胞。因此建立大鼠實(shí)驗(yàn)性矽肺模型，對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)大鼠肺組織和外周血中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80及其相關(guān)細(xì)胞因子進(jìn)行檢測(cè)。初步探討其在矽肺發(fā)生發(fā)

2、展過程中的作用及意義，為進(jìn)一步開展矽肺免疫干預(yù)研究提供新思路和理論依據(jù)。
　　方法:
　　1、選用河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的無特定病原體（Specific pathogen free， SPF）健康成年雄性SD大鼠96只，體重200~250g。將其隨機(jī)分為2組：染塵組、對(duì)照組。
　　2、采用非氣管暴露法染塵建立大鼠矽肺模型，分別在染塵前、染塵后24h、1周、2周3周、6周、9周、12周處死6只。
　　3、流式細(xì)胞術(shù)

3、對(duì)外周血中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80進(jìn)行檢測(cè)。
　　4、免疫組化法對(duì)肺組織中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80進(jìn)行定位、分布。
　　5、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)肺組織中細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-18、IL-4和IL-10的表達(dá)。
　　6、統(tǒng)計(jì)方法：采用Excel2007建立數(shù)據(jù)集，應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分

4、析，數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)描述以( X±S)表示，兩組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)；Pearson相關(guān)進(jìn)行相關(guān)性分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
　　結(jié)果:
　　1、染塵組外周血CD80和MHC-Ⅱ的表達(dá)量在染塵后逐漸升高，在2周表達(dá)量最高并保持穩(wěn)定。染塵組與對(duì)照組外周血CD80、MHC-Ⅱ的表達(dá)量在染塵2周后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；染塵組肺組織CD80表達(dá)量在染塵后逐漸增加，在2周表達(dá)量最高并保持穩(wěn)定，染塵組與對(duì)照組肺組織CD80的表達(dá)

5、量在染塵2周后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。染塵組肺組織 MHC-Ⅱ表達(dá)量在染塵后1周到達(dá)高峰并保持穩(wěn)定，染塵組與對(duì)照組肺組織MHC-Ⅱ在染塵1周后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2、染塵后各時(shí)間點(diǎn)染塵組TNF-α表達(dá)量均高于對(duì)照組（P＜0.05）；染塵后24h、1周和2周染塵組IFN-γ表達(dá)量高于對(duì)照組（P＜0.05）；染塵后1周染塵組中IL-4表達(dá)量低于對(duì)照組（P＜0.05），染塵后9周及12周高于與對(duì)照組（P＜0.05）；染塵后