催產素系統(tǒng)在抑郁癥中的改變：與雄激素的關聯.pdf

1、背景:
　　下丘腦室旁核(paraventricular nucleus，PVN)合成的催產素(oxytocin，OXT)兼具內分泌激素和神經遞質/調質功能。OXT被推測在親社會行為、抗應激反應等中樞調節(jié)中起重要作用，但是具體作用機制未明。抑郁癥患者外周血漿OXT水平變化方向的報道也存在矛盾。此外，在許多神經精神疾?。òㄒ钟舭Y）中，研究者觀察到睪酮與OXT呈相反變化趨勢，而原因未明。OXT的效應通過催產素受體(oxytocin

2、receptor,OXTR)而實現。迄今為止，OXT和OXTR是否及如何參與抑郁癥發(fā)病，雄激素能否直接調控OXT基因表達等科學問題仍未闡明。為了揭示OXT在抑郁癥患者腦內發(fā)生的改變以及睪酮對OXT的可能調控機制，為深入研究OXT參與抑郁癥發(fā)病的作用機制以及性甾體對該過程的調控提供依據，我們在抑郁癥患者下丘腦PVN中檢測OXT的表達，同時檢測OXT表達神經元是否表達雄激素受體（androgen receptor，AR）;繼而我們鑒定了人O

3、XT基因啟動子區(qū)域的雄激素反應單元（androgen response element,ARE），檢測雄激素調控人OXT基因表達的分子機制;我們還檢測了抑郁癥患者死亡后腦脊液內睪酮水平變化以及抑郁癥患者前扣帶回(anterior cortex,ACC)和背外側前額葉（dorsolateral prefrontal cortex，DLPFC）內OXTR mRNA和AR mRNA表達水平改變。ACC和DLPFC不僅是OXT的重要投射腦區(qū)，也

4、是參與情緒調控和抑郁癥發(fā)病的重要前額葉腦區(qū)。
　　方法:
　　(1)采用免疫細胞化學和圖像分析技術，研究抑郁癥患者下丘腦PVN內OXT表達水平的變化;采用免疫細胞化學雙標技術，研究人體下丘腦PVN內OXT神經元和AR是否存在共表達。
　　(2)采用免疫熒光染色技術和實時熒光定量PCR檢測睪酮對入神經母細胞瘤細胞SK-N-SH內源性OXT表達的影響;通過凝膠遷移實驗和免疫共沉淀反應，鑒定人OXT基因啟動子區(qū)域是否存在具有

5、結合活性的ARE;通過構建OXT啟動子熒光素酶報告基因系統(tǒng)，檢測雄激素對人OXT基因表達的調節(jié)效應。
　　(3)通過酶聯免疫吸附實驗，檢測死亡后抑郁癥患者和對照者腦脊液中睪酮水平的差異。
　　(4)通過實時熒光定量PCR，檢測抑郁癥患者ACC、DLPFC腦區(qū)內OXTR mRNA和AR mRNA表達水平的變化，并對上述實驗中的相關參數進行分析。
　　結果:
　　(1)與對照組相比，抑郁癥患者下丘腦PVN內OXT神經

6、元表達顯著增多(p=0.027);下丘腦PVN內OXT神經元存在與AR共表達，而且AR主要分布在OXT細胞核內。
　　(2)人神經母細胞瘤細胞SK-N-SH能內源性表達OXT和AR，采用雌激素受體拮抗劑和睪酮處理該細胞系，細胞內源性OXT的表達顯著下降(p=0.05); OXT基因啟動子區(qū)域存在ARE，睪酮能通過AR與ARE結合抑制OXT基因啟動子熒光素酶報告基因的表達活性(p=0.02)。
　　(3)與對照組相比，抑郁癥患

7、者腦脊液睪酮水平無顯著改變。女性抑郁癥患者(r=0.610，p=0.046)以及男、女性重性抑郁障礙（major depressive disorder, MDD）患者(r=0.550，p=0.042)腦脊液睪酮的水平與年齡成正相關，而男性抑郁癥患者以及男、女性雙相障礙(bipolar disorder，BD)患者中不存在這種相關性。
　　(4)抑郁癥患者ACC和DLPFC內OXTR mRNA和AR mRNA的表達水平和對照組之間

8、無顯著差異。男性對照組ACC內(r=0.703，p=0.034)和DLPFC內(r=0.657，p=0.02)內AR mRNA的表達水平與年齡存在顯著正相關，ACC內還存在AR mRNA和OXTR mRNA表達的正相關(r=0.810，p=0.008);而男性對照組DLPFC內這種相關性則缺失，女性對照組和男女性抑郁癥患者組內AR mRNA和OXTR mRNA表達的顯著相關性缺失。然而，BD患者ACC內AR mRNA和OXTR mRNA

9、存在顯著正相關(r=0.971，p=0.000)，而其DLPFC內也觀察到AR mRNA和OXTRmRNA正相關趨勢(r=0.682，p=0.092)。最后，男性對照組DLPFC內OXTRmRNA(p=0.007)和AR mRNA(p=0.032)的表達水平顯著低于女性，但是，由于女性組樣本量較?。行?9，女性=3），該結果還需擴大樣本量而獲得確認。
　　結論:
　　抑郁癥患者下丘腦PVN內的OXT表達顯著上升。雄激素能通