脂聯(lián)素對(duì)APN---小鼠體內(nèi)巨噬細(xì)胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的影響及其作用機(jī)制.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  研究脂聯(lián)素對(duì)脂聯(lián)素基因敲除小鼠(APN-/-小鼠)的體內(nèi)巨噬細(xì)胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的影響和抗動(dòng)脈粥樣硬化中可能的作用機(jī)制。
  方法:
  1.模型建立
  選擇4周齡脂聯(lián)素基因敲除小鼠(Adiponectin-/-gene knock out mice)30只,高脂喂養(yǎng)8個(gè)月,建立動(dòng)脈粥樣硬化模型。
  2.分組
  隨機(jī)分為五組:空白對(duì)照組,50μg/(kg· d)干預(yù)組,150μg/(kg

2、· d)干預(yù)組,200μg/(kg· d)干預(yù)組,250μg/(kg· d)干預(yù)組。
  3.方法
  脂聯(lián)素干預(yù)4周后,向APN-/-小鼠腹腔內(nèi)注射乙?;疞DL與3H‐TC標(biāo)記的RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞懸液,使用酶法測(cè)定小鼠血清血脂水平,液閃計(jì)數(shù)儀測(cè)定小鼠肝臟、血清及糞便中3H‐TC占經(jīng)腹腔注射3H‐TC總量的百分比,使用RT-PCR及Western-blot檢測(cè)ABCA1的mRNA及蛋白表達(dá)水平。
  結(jié)果:<

3、br>  1.與對(duì)照組相比,脂聯(lián)素干預(yù)組血清TG、TC、LDL水平明顯降低,HDL升高;且隨脂聯(lián)素呈劑量依賴性改變。
  2.對(duì)照組主動(dòng)脈粥樣硬化病變明顯,光鏡下可見(jiàn)血管壁有大量脂質(zhì)沉積,有粥樣斑塊形成,有散在泡沫細(xì)胞;使用脂聯(lián)素干預(yù)組APN-/-小鼠的主動(dòng)脈粥樣硬化病變程較輕,隨脂聯(lián)素呈劑量依賴性改變。
  3.脂聯(lián)素干預(yù)組血清3H‐TC含量明顯降低(P<0.05),肝臟及糞便中3H‐TC含量明顯升高(P<0.05)。

4、r>  4.RT-PCR檢測(cè)結(jié)果示:與對(duì)照組相比,脂聯(lián)素干預(yù)組肝臟組織ABCA1的mRNA轉(zhuǎn)錄水平明顯提高,且隨脂聯(lián)素劑量的增加而增加(P<0.05),呈劑量依賴性。
  5.Western-blot結(jié)果示:與對(duì)照組相比,使用脂聯(lián)素干預(yù)的實(shí)驗(yàn)組肝臟組織ABCA1的蛋白表達(dá)水平明顯提高,且隨脂聯(lián)素劑量的增加而增加(P<0.05),呈劑量依賴性。
  結(jié)論:
  1.脂聯(lián)素能夠降低血清TC、TG及LDL水平,提高HDL;<

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