SREBP-1及內(nèi)源性脂肪酸合成相關(guān)蛋白在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的作用.pdf

1、目的：
　　大腸癌是常見的消化道惡性腫瘤之一，其發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。大腸腺瘤與大腸癌關(guān)系密切，約80％大腸癌由大腸腺瘤演變而來，其形成及癌變機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，目前尚不明確。
　　脂類代謝異常在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用日益受到關(guān)注。脂質(zhì)代謝改變尤其是脂肪酸合成顯著增加是腫瘤細(xì)胞快速增殖的一個(gè)重要標(biāo)志，不同于正常細(xì)胞直接利用循環(huán)中的脂肪酸，惡性腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)增殖所需的脂肪酸主要來源于從頭合成途徑。固醇調(diào)節(jié)原件結(jié)合蛋白1(isterol re

2、gulatory element-binding proteins-1，SREBP-1)是調(diào)控脂肪酸從頭合成途徑（DNL）中的關(guān)鍵因子，直接影響脂肪酸從頭合成途徑中關(guān)鍵酶脂肪合酶（fatty acid synthase，F(xiàn)ASN）的生成。FASN是SREBP-1的下游靶基因，二者合稱為代謝原癌基因。研究發(fā)現(xiàn)在不同類型腫瘤的相對(duì)早期階段，脂肪酸合成通路就已開始上調(diào)并且SREBP-1在肺癌、乳腺癌、卵巢癌等腫瘤細(xì)胞中呈高表達(dá)，但在大腸癌中的

3、相關(guān)研究鮮見報(bào)道。SREBP-1的活性主要受 PI3K-Akt-mTOR通路調(diào)節(jié)，通路中的哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin complex， mTOR）及上游刺激因子1（upstream stimulatory factors1，USF1）對(duì)SREBP-1起重要調(diào)節(jié)作用：mTOR通過增加TSC1/2的表達(dá)及促進(jìn)Akt在S473位點(diǎn)的磷酸化而上調(diào)SREBP-1表達(dá)；USF1其基本HLH結(jié)構(gòu)

4、域直接與SREBP-1的N-末端區(qū)域的HLH結(jié)構(gòu)域相互作用，從而也對(duì)SREBP-1的表達(dá)起到促進(jìn)作用。
　　為探討脂肪酸的從頭合成途徑是否在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中發(fā)揮作用，本研究采用免疫組化方法檢測(cè)脂肪酸從頭合成途徑中的關(guān)鍵蛋白SREBP-1、p-mTOR、FASN及USF1的表達(dá)情況并對(duì)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，進(jìn)一步揭示其在大腸腺瘤癌變中的意義，為大腸腺瘤癌變預(yù)防和臨床治療及預(yù)后提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　1采

5、用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)SREBP-1及內(nèi)源性脂肪酸合成相關(guān)因子（p-mTOR、USF1、FASN）在40例正常大腸黏膜、112例不同程度異型增生大腸管狀腺瘤以及100例大腸管狀腺瘤癌變組織中的表達(dá)，分析其與臨床病理特征的關(guān)系，并進(jìn)一步進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　2用SPSS21.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，應(yīng)用χ2檢驗(yàn)、wilcoxon符號(hào)秩和檢驗(yàn)和spearman相關(guān)性分析，P<0.05代表有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　

6、1免疫組織化學(xué)結(jié)果
　　1.1 SREBP-1在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達(dá)情況
　　SREBP-1蛋白在正常大腸黏膜組、異型增生組和瘤癌變組中的陽性表達(dá)率分別為7.5%、37.5%、77.0%，其中腺瘤組和癌變組明顯高于正常粘膜組（P<0.05），癌變組明顯高于腺瘤組（P<0.05）。SREBP-1蛋白在上皮輕、中、重度異型增生管狀腺瘤組的陽性表達(dá)率分別為20.0%、35.0%、62.5%，依次升高（P<0.05）。

7、其中重度異型增生組高于輕、中度異型增生組（P<0.05），輕度及中度異型增生組間無差異（P>0.05）。
　　1.2 p-mTOR在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達(dá)情況
　　p-mTOR蛋白在正常大腸黏膜組、管狀腺瘤異型增生組和管狀腺瘤癌變組中的陽性表達(dá)率分別為5.0%、34.8%、87.0%，依次升高（P<0.05），其中腺瘤組和癌變組明顯高于正常粘膜組（P<0.05），癌變組明顯高于腺瘤組（P<0.05）。p-mTOR

8、蛋白在上皮輕、中、重度異型增生管狀腺瘤組中的陽性表達(dá)率分別為17.7%、35.0%、59.4%，依次升高（P<0.05），其中重度異型增生組高于輕、中度異型增生組（P<0.05），中度異型增生組高于輕度異性增生組（P<0.05）。
　　1.3 FASN在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達(dá)情況
　　FASN蛋白在正常大腸黏膜組、管狀腺瘤異型增生組和管狀腺瘤癌變組中的陽性表達(dá)率分別為10.0%、32.1%、85.0%，依次升高（

9、P<0.05），其中腺瘤組和癌變組明顯高于正常粘膜組（P<0.05），癌變組明顯高于腺瘤組（P<0.05）。FASN蛋白在上皮輕、中、重度異型增生管狀腺瘤組中的陽性表達(dá)率分別為12.5%、32.5%、56.3%，依次升高（P<0.05），其中重度異型增生組明顯高于輕、中度異型增生組（P<0.05），中度異型增生組高于輕度異性增生組（P<0.05）。
　　1.4 USF1在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的表達(dá)情況
　　USF1蛋

10、白在正常大腸黏膜組、異型增生管狀腺瘤組和管狀腺瘤癌變組中的陽性表達(dá)率分別為20.0%、47.3%、65.0%，依次升高（P<0.05），其中腺瘤組和癌變組明顯高于正常粘膜組（P<0.05），癌變組高于腺瘤組（P<0.05）。USF1蛋白陽性表達(dá)率在上皮輕、中、重度異型增生管狀腺瘤組依次升高（分別為20.0%、42.5%、87.5%），其中重度異型增生組明顯高于輕、中度異型增生組（P<0.05），中度異型增生組明顯高于輕度異型增生組（P<

11、0.05）。
　　2 SREBP-1及內(nèi)源性脂肪酸合成相關(guān)蛋白（p-mTOR、FASN及USF1）與臨床病理特征關(guān)系
　　2.1 SREBP-1蛋白的表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系
　　管狀腺瘤癌變組中SREBP-1蛋白陽性表達(dá)率與腫瘤分化程度相關(guān)，隨著分化程度的降低，SREBP-1蛋白陽性表達(dá)率依次升高（χ2=18.368， P<0.05）；與性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Dukes分期以及浸潤(rùn)深度無相關(guān)性（P>0.

12、05）。
　　2.2 p-mTOR蛋白的表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系
　　癌變組中p-mTOR蛋白陽性表達(dá)率與腫瘤分化程度、浸潤(rùn)深度相關(guān)，隨著分化程度降低、浸潤(rùn)深度增加， p-mTOR蛋白陽性表達(dá)率增高（χ2=6.917、χ2=7.078，均P<0.05）；而與性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Dukes分期無相關(guān)性（P>0.05）。
　　2.3 FASN蛋白的表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系
　　癌變組中FASN蛋白異常表

13、達(dá)率與分化程度，隨著分化程度降低， FASN蛋白異常表達(dá)率增高（χ2=10.080， P<0.05）；與性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、Dukes分期、浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性（P>0.05）。
　　2.4 USF1蛋白的表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系
　　癌變組中USF1蛋白陽性表達(dá)率與分化程度，隨著分化程度降低， USF1蛋白陽性表達(dá)率增高（χ2=8.487， P<0.05）；而與性別、年齡、腫瘤發(fā)生部位、Dukes分期、浸潤(rùn)深度

14、和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性（P>0.05）。3 SREBP-1與內(nèi)源性脂肪酸合成相關(guān)蛋白（p-mTOR、FASN及USF1）的相關(guān)性分析
　　結(jié)果顯示腺瘤組 SREBP-1與 p-mTOR、FASN、USF1呈正相關(guān)(r=0.247，r=0.494，r=0.397， P<0.05）；癌變組SREBP-1與p-mTOR、FASN、USF1呈正相關(guān)(r=0.213，r=0.702，r=0.247， P<0.05）。
　　結(jié)論：

15、　　1 SREBP-1蛋白表達(dá)隨著腺瘤異型增生程度的增高及癌變的出現(xiàn)，其陽性表達(dá)率明顯增高，并且與大腸癌分化程度有關(guān)，提示SREBP-1可能參與了散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變的發(fā)生發(fā)展。
　　2脂肪酸從頭合成相關(guān)因子（p-mTOR、FASN、USF1）在正常大腸粘膜、不同程度異型增生管狀腺瘤組和腺瘤癌變組中表達(dá)均依次升高，提示可能與大腸癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。
　　3 SREBP-1與脂肪酸從頭合成相關(guān)因子呈正相關(guān)，提示SREBP-1與