陽虛質膝骨性關節(jié)炎軟骨組織Sox9、Col2al的表達研究.pdf

1、目的：通過檢測膝關節(jié)軟骨 Sox9、Col2al基因在陽虛質與平和質兩者之間的表達水平，從分子、蛋白水平分析中醫(yī)體質類型中陽虛質膝骨性關節(jié)炎患者體內Sox9、Col2al基因表達，比較膝骨性關節(jié)炎陽虛質與平和體質的Sox9及Col2al基因水平差異，探討膝骨性關節(jié)炎中 Sox9、Col2al與中醫(yī)體質的內在聯(lián)系和規(guī)律，從中醫(yī)體質學角度研究膝骨性關節(jié)炎的發(fā)生和發(fā)展規(guī)律與人體體質因素的相關性，深刻認識陽虛質膝骨性關節(jié)炎的發(fā)病本質，為中醫(yī)體質

2、學說預防和治療陽虛質膝骨性關節(jié)炎提供理論參考。
　　方法：2012年10月20日—2014年12月27日，對甘肅省中醫(yī)院關節(jié)骨科門診及住院部確診為膝骨性關節(jié)炎的患者進行中醫(yī)體質問卷調查，同時調查、收集非膝骨性關節(jié)炎正常人群的一般資料。所有調查、收集均按統(tǒng)一設計的研究病例報告表逐項進行問卷調查。并于2014年2月1日—2014年12月28日，對甘肅省中醫(yī)院關節(jié)骨科住院部確診為膝骨性關節(jié)炎并做膝關節(jié)置換術的患者，在手術過程中，快速、無

3、菌采集患者膝關節(jié)外側軟骨標本。取材均經患者及其親屬的知情同意，并獲得甘肅省中醫(yī)院倫理委員會的同意和認可。標本離體后，分別留取與病理取材部位相一致處的關節(jié)軟骨組織，經玻璃化法后以最快的速度投入液氮中保存并統(tǒng)一存放于-80℃冰箱。標本取出后，對膝骨性關節(jié)炎患者進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計后確定高發(fā)體質（陽虛質）與平和質膝骨性關節(jié)炎患者及陽虛質非膝骨性關節(jié)炎患者（對照組）標本 HE染色，在顯微鏡下觀察不同體質 KOA患者軟骨的病理改變，采取免疫組化及Real

4、-Time RT-PCR的方法檢測Sox9基因、Col2al在陽虛質膝骨性關節(jié)炎患者膝關節(jié)軟骨細胞 mRNA及蛋白水平的表達，分析患者體內相關蛋白水平高表達與中醫(yī)體質之間的關系，全部臨床資料建成EXCEL數(shù)據(jù)庫，統(tǒng)計分析采用SPSS17.0軟件。
　　結果：在對實驗結果進行分析后發(fā)現(xiàn)在不同體質的KOA患者中，陽虛質KOA患者中軟骨內細胞排列紊亂，細胞聚集成團或者局部退化消失，Sox9在軟骨細胞核中表達，Col2al在細胞外基質中表

5、達，在平和質KOA、陽虛質非KOA患者軟骨細胞內呈現(xiàn)高表達狀態(tài)，在陽虛質 KOA相對平和體質表達比較低，兩者的表達均有顯著差異（P＜0.05）。
　　結論：膝骨性關節(jié)炎發(fā)病的體質危險因素主要為陽虛質。在分子表達水平Sox9及Col2al均呈現(xiàn)低表達，其與中醫(yī)體質存在一定的內在相關性，說明體質因素是誘發(fā)膝骨性關節(jié)炎的高危因素，因人的體質是相對恒定的，某一疾病的誘發(fā)是具有時間性的，故陽虛質是膝骨性關節(jié)炎中誘導Sox9及Col2al低表