共振光散射技術(shù)在藥物與核酸分析中的應用研究.pdf

1、光散射技術(shù)自其建立以來，經(jīng)過不斷的完善和發(fā)展，已廣泛應用于高分子聚合物科學，膠體科學及生命科學的研究中。1993年，Pasternack等通過在普通的熒光分光光度計上測定散射光信號建立了共振光散射(RLs)技術(shù)，該技術(shù)由于具有操作上的簡便性和高度的靈敏性已引起人們的廣泛關(guān)注，并成功應用于分析化學研究的各個領(lǐng)域。但是，共振光散射采用單一波長處的強度作為其表征手段容易受外界因素的干擾，導致信號不穩(wěn)定，因此，有必要進一步發(fā)展共振光散射技術(shù)，克

2、服其缺陷，擴展其應用范圍。本文在研究普通光散射的基礎(chǔ)上，提出了雙波長散射/熒光比率法，并用于生物大分子的分析測定。研究內(nèi)容包括下列三個方面： (1)在pH 4.6的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液中，環(huán)丙沙星與四苯硼鈉作用在385.0 nm處產(chǎn)生的特征光散射信號(Ls)能應用普通熒光分光光度計檢測，從而建立了環(huán)丙沙星的光散射分析法。增強的光散射強度(△I<,LS>)與0.03～0.2μg/mL，0.2～2.5μg/mL 兩個范圍內(nèi)的環(huán)丙沙星

3、溶液呈線性關(guān)系，檢出限分別為7.4 ng/mL，2.7 ng/mL。本實驗中研究了酸度、聚乙二醇600溶液的濃度、四苯硼鈉溶液的濃度以及共存物質(zhì)對LS強度的影響。與藥典使用的高效液相色譜(HPLC)方法對照，結(jié)果表明LS方法可用于鹽酸環(huán)丙沙星片劑中環(huán)丙沙星含量的測定。 (2)在十二烷基苯磺酸鈉(sDBS)膠束體系中，AgNO<,3>與I<'->生成穩(wěn)定的AgI膠體，在437.0 nm處產(chǎn)生增強的共振光散射(RLS)信號，其增強的

4、共振光散射強度(△I<,RLS>)與0.03～4.4μg/mL范圍內(nèi)的I<'->溶液呈線性關(guān)系，由此建立測定I<'->的靈敏方法，檢出限為2.6 ng/mL。此方法用于合成樣的測定，回收率在99.3-106.7％之間，RSD小于2.8％。 (3)在pH 9.62的BR緩沖溶液中，陽離子染料吖啶橙(AO)與魚精DNA(fsDNA)通過靜電作用形成二元復合物，導致AO在激發(fā)波長272.0 nm處，產(chǎn)生增強的散射光，而在發(fā)射波長534