葡聚糖-胍基丁胺衍生物非病毒轉基因載體.pdf

1、本文利用對甲苯磺?；暇厶桥c胍基丁胺的親核取代反應制備了葡聚糖-胍基丁胺衍生物（Dex-Agm）載體；并采用CDI活化法先合成了月桂酸酯基-O-對甲苯磺?；暇厶?，再與胍基丁胺發(fā)生親核取代反應制備了月桂酸修飾的葡聚糖-胍基丁胺衍生物（Dex-L-Agm）載體。凝膠電泳、透射電鏡和Zeta電位測定結果表明，Dex-Agm載體可將DNA壓縮成納米復合物，經(jīng)月桂酸改性后增強了壓縮DNA的能力，這可能與月桂酸疏水鏈段的物理吸附過程有關。對于CO

2、S-7和HEK293細胞系，胍基丁胺取代度的增加和疏水鏈段月桂酸的引入都可使載體介導的熒光素酶的表達量增加。通過流式細胞儀半定量分析了載體介導綠色熒光蛋白（GFP）在COS-7、HEK293和CHOK1細胞系中的表達，結果表明，疏水鏈段月桂酸的引入可明顯增加GFP的表達水平。通過溶血、紅細胞聚集實驗以及載體和其降解產(chǎn)物的細胞毒性實驗，考察了Dex-Agm和Dex-L-Agm載體的生物相容性，結果顯示，所構建的載體不會造成溶血和紅細胞聚集

3、，這可能是由于載體的側鏈胍基丁胺上的胍基與細胞膜組分之間存在的是雙齒氫鍵作用，而不是會破壞細胞膜的強靜電作用。將細胞與Dex-Agm和Dex-L-Agm載體和其降解產(chǎn)物培養(yǎng)一定時間后，仍能維持80％存活率?？梢?，胍基丁胺修飾的葡聚糖載體有望成為一種理想的非病毒轉基因載體。
　　本文還通過以上提到的親核取代反應，只改變胍基丁胺與組胺的摩爾投料比，制備了組胺修飾的葡聚糖-胍基丁胺衍生物（Dex-Agm-His）載體。結果表明，組胺引入