東北玉米自交系Bt基因遺傳轉化的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、東北農業(yè)大學碩士學位論文東北玉米自交系Bt基因遺傳轉化的研究姓名：侯艷華申請學位級別：碩士專業(yè)：植物學指導教師：徐仲2003.5.1東北農業(yè)大學理學硬士學位論文StudyonthegenetiCtransformationofBtgeneintomaizeinbredlinesinNortheastMaizeWaSallimportantgraincropsandforagecrops，itwasalsoamodemfoodindus時

2、andanimportantnIWmaterialofmedicalandchemicalindosArysoeachcountrypaledmoreattentiontoit’Sgenetictransformation，Owingtothecoflnementofthehostofagrobactrinmtumefliensandthedifficultiesofthemaizeinbredlinesforobtainingembr

3、yogeniccaili，thegeneticsystemofmaizeWash’tidealenoughInthisexperiment，theimmatureembryoswereused硒explanttoinducecalliandBtgenewastranferedintoM017、81162、Ji846and7922bytheAgrobactriummediatedWehavegainedthepositiveplantsd

4、eterminedbyPCRMeanwhilethemajorfactorsinfluencingtheregenerationsystemandtransformationsystemforagrobactedummediatedmethodwereoptimizedThemainresultswereshowedasfolloMng：1InductionofembryogeniccalliWasinheritableDitieren

5、tmaizegenotypesshoweddifferentabilityofemberyogeniccalliestabilishmentandplantregenerationM017、Ji846、81162and7922hadthemosthi【gIIrateofinduction，Ye107、5416and444werehigh，butLongKangllandDongNon946hadlittlerateofit；Thecon

6、centrationof24一Dhadanenfluenceonthem0pha’growthanddifierentiationofcalliOnthewhole，2mg凡24一DwasfoundtobemostfavorablefortheinductionofembryogeniccallliButthesensitivityto2，4一Dvariedamonggenotypes，M017and5416need3mg／L24一Di

7、nthecourseofjnduction2TheresisteoceoftransformatorswereselectedbyG418afterCOculturewithagrobactriumtumeflienwhichWas40meCLinsubculturedmediumand50mg／LindiffereniatedmediumIntheprocessofkillingagrobactrium，CefAmporCarbwer

8、ealsousefulandthetimeofinhibitionWaslongtooAstheconcentrationofthreeantibioticWas50mg／L，300mg／L，400mg／LrespectivelyWechose50mg／LCarbasantibiotic3Thefactorsinfluencingthetransformationcfficiencyforagrobacteriummedialedmet

9、tIodsweremainlystudiedthepreculture，theconcentrationofagrobacterium，thetimeofirifectionandtheeffectofASTheefrectofthedaysofprecultureontherateoftransformationhadnonotabledifference；Thee搦ciencyoftransformationwashi【ghwhen

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