水稻紫色柱頭基因的精細定位與克隆.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、花青素是植株產生不同顏色的物質基礎。水稻不同組織和器官會出現不同的顏色，如紫色、紅色和無色，都是花青素積累的結果。
　　秈型水稻品種協青早（XQZ）柱頭呈現紫色，葉鞘和稃尖呈現紅色。將協青早與白色柱頭、無色稃尖的水稻粳稻品種Kitaake雜交，其F1植株全部表現出紫色柱頭和紅色稃尖，F2代群體出現三種分離表型，即紫色柱頭紅色稃尖、白色柱頭紅色稃尖、白色柱頭無色稃尖，分離比符合9：3：4。這些結果表明，紫色柱頭顏色是由2對顯性互補基

2、因控制，其中1對基因控制紅色稃尖性狀。在F2群體中，選擇1300個白色柱頭紅色稃尖單株進行基因型分析，結果將1個顯性基因定位在第1染色體InDel標記Z8和Z20之間，物理距離120 kb的區(qū)間；選擇500個白色柱頭無色稃尖的F2單株進行基因型分析，結果將另一個基因定位到第6號染色體SSR標記RM19556和RM19561之間的106 kb區(qū)間內，與dCAPs標記dCAP13共分離。參照日本晴序列進行候選基因預測，發(fā)現第1號染色體120

3、 kb目標區(qū)間包含15個候選基因，對這些基因進行測序發(fā)現，ORF5在親本協青早和Kitaake之間存在序列差異，該基因編碼參與花青素合成的關鍵酶-二氫黃酮醇還原酶（DFR）,命名為Ps-a；第6號染色體106 kb目標區(qū)間內包含一個控制水稻稃尖顏色的基因,將其命名為Ps-b。因此，我們優(yōu)先將這兩個基因確定為控制紫色柱頭性狀的候選基因。
　　為了確定Ps-a和Ps-b基因在紫色柱頭形成中的功能與作用，我們從協青早中克隆并獲得了Ps-

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