RNA干擾抑制宮頸癌Hela細胞株HPV18 E6、E7的實驗研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學博士學位論文RNA干擾抑制宮頸癌Hela細胞株HPV18E6、E7的實驗研究姓名：王雪蓮申請學位級別：博士專業(yè)：病原生物學指導教師：安春麗20070401中文論著摘要RNA干擾抑制宮頸癌Hela細胞株HPVl8E6、E7的實驗研究目的宮頸癌是女性最常見的生殖道惡性腫瘤，其病死率居女性癌癥病死率的第二位，是嚴重威脅婦女健康的主要疾病之一。研究證實，高危型人乳頭瘤病毒(humanpapillomavirus，HPⅥ是導致富頸癌的

2、主要原因。幾乎所有的宮頸癌組織含有IIPV，其中，HPV16、HPV18是最常見的型別。HPVl8高表達的宮頸癌具有浸潤性強、從宮頸非典型增生到浸潤癌進展快、淋巴轉移率高、復發(fā)率高等特點，而目前臨床采用的治療方法，如手術、放療和化療等方法創(chuàng)傷大，副反應重，而且可能剝奪年輕患者的生育功能。隨著宮頸癌發(fā)病的年輕化和患者對治療后生活質量要求的提高，尋求一種新的微創(chuàng)、副反應小、可以根治腫瘤的方法勢在必行。Hela細胞為人宮頸腺癌細胞株，細胞內(nèi)有

3、HPVl8基因組。研究證實，高危型HPVl8基因組中E6、E7基因是惡性轉化基因，具有細胞轉化功能，其編碼的E6、E7蛋白同時表達是惡性轉化、惡性表型維持的關鍵。高危型HPVE6、E7與細胞周期調(diào)節(jié)因子P53、視網(wǎng)膜母細胞瘤蛋白(RetinoblastomaproteinpRB)相互作用，直接干預細胞周期進程，在HPV誘導腫瘤形成過程中發(fā)揮至關重要的作用。因而HPVE6、E7成為IIPV陽性宮頸癌基因治療的理想靶標。RNAi作為一種新的

4、用于基因功能和基因治療研究的工具，具有特異性高、穩(wěn)定性好，抑制作用強、細胞攝取容易等優(yōu)點，已被廣泛用于病毒的基因功能及病毒相關疾病的基因治療研究，并取得了令人欣喜的效果。但有關RNAi抑制HPVl8及細胞內(nèi)HPVl8惡性轉化基因E6抑制后細胞周期調(diào)控因子變化的研究較少。本研究以HPVl8E6為靶標，利用RNAi技術進行以下研究：①針對高度保守的、具有惡性轉化作用的HPVl8E6基因設計同源小干擾RNA(smallinterference